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來源于極端嗜酸菌的泛應急蛋白FaUSPA基因、表達載體及其構建和應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-08-08
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201210585227.8 
  • 技術(專利)名稱 來源于極端嗜酸菌的泛應急蛋白FaUSPA基因、表達載體及其構建和應用 
  • 項目單位 上海市農業科學院
  • 發明人 彭日荷,姚泉洪,田永生,趙偉,付曉燕,朱波,許晶,高建杰,韓紅娟,王波,王麗娟,韓靜,薛永 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 鄭茜樺
  • 發布時間 2021-08-08  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種來源于極端嗜酸菌的泛應急蛋白FaUSPA基因、表達載體及其構建和應用。所述的泛應急蛋白FaUSPA基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO1所示,通過構建包含還基因的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體,經試驗表明,該基因能夠在梭菌中穩定高效表達,有效提高了梭菌對丁醇的耐受性。同時,利用厭氧發酵,還表明該基因能夠大幅度提高梭菌產丁醇能力。
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  • 02

    說明書

    1.一種來源于極端嗜酸菌Ferroplasmaacidarmanus的泛應急蛋白FaUSPA基因,其核苷酸序列如SEQIDNO1所示。2.包含權利要求1所述的來源于來極端嗜酸菌的泛應急蛋白FaUSPA基因的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體,所述表達載體是以pSOS94載體為基礎載體,將氯霉素抗性基因表達單元,梭菌CAC3645基因啟動子、權利要求1所述的FaUSPA基因的閱讀框表達單元和枯草桿菌pyruvatekinase基因終止子定向連接后替換pSOS94載體中的ctfAB及abc表達單元構建而成的;其中,所述梭菌CAC3645基因啟動子的堿基序列如SEQIDNO2所示。3.根據權利要求2所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體,其特征在于,從pXYP251載體中擴增氯霉素表達單元,引物為cm1:5’-AAGCTTATAACTTCGTATAATGTATGCTATACGAAG-3’,cm2:5’-TCTAGATATACGAAGATAACTTCGTATAGCATACAT-3’;擴增條件為94℃30s,60℃30s,72℃60s;25循環。4.根據權利要求2所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體,其特征在于,從梭菌C.acetobutylicumATCC824中擴增CAC3645基因啟動子,引物為c3645z:5’-TCTAGATAACCTGTAAAAAGATGATGG-3’,c3645f:5’-GGATCCCTTGTTTCTCCTCTCACTTGA-3’。擴增條件為94℃30s,60℃30s,72℃30s;25循環。5.根據權利要求2所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體,其特征在于,從枯草桿菌Bacillussubtilis168中擴增PYK基因終止子,引物為pyk1:5’-GAGCTCTTACAGGTGAAAATGGAAGGGGA-3’,pyk2:5’-CATATGTATAGCGGGTAACCCAACGGGATAAGAAGACAGGCGCCG-3’;擴增條件為94℃30s,60℃30s,72℃30s;25循環。6.如權利要求1所述的來源于來極端嗜酸菌Ferroplasmaacidarmanus的泛應急蛋白FaUSPA基因在提高梭菌丁醇耐受性中的應用。7.如權利要求1所述的來源于來極端嗜酸菌Ferroplasmaacidarmanus的泛應急蛋白FaUSPA基因在提高梭菌丁醇產量中的應用。
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專利技術附圖

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