本發明屬于生物工程技術領域，涉及一種β?胡蘿卜素單加氧酶的制備方法及其應用。一種β?胡蘿卜素單加氧酶的制備方法，構建β?胡蘿卜素單加氧酶基因的原核表達載體，將原核表達載體導入大腸桿菌中表達，經Ni?NTA柱親和層析和分子篩純化后，得到純化的普β?胡蘿卜素單加氧酶。所述β?胡蘿卜素單加氧酶作為催化劑，在反應液中催化底物β?胡蘿卜素，反應溫度45?55℃，反應時間20?30 h，反式視黃醛的轉化率達89.5%。本發明建立了棲熱菌β?胡蘿卜素單加氧酶制備全反式視黃醛的方法，并優化了反應條件，經優化后全反式視黃醛轉化率達到89.5%。

1. 一種β-胡蘿卜素單加氧酶的制備方法，其特征在于：構建β-胡蘿卜素單加氧酶基因的原核表達載體，將原核表達載體導入大腸桿菌中表達，經Ni-NTA柱親和層析和分子篩純化后，得到純化的β-胡蘿卜素單加氧酶；所述β-胡蘿卜素單加氧酶基因，共960堿基，核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，其編碼的β-胡蘿卜素單加氧酶，共319氨基酸，氨基酸序列如SEQID NO：4所示。2.一種由權利要求1的制備方法所制備的β-胡蘿卜素單加氧酶的應用，其特征在于：所述β-胡蘿卜素單加氧酶作為催化劑，在反應液中催化底物β-胡蘿卜素，反應溫度45-55℃，反應時間20-30 h，反式視黃醛的轉化率達89.5%；所述反應中反應液的成分為：50mmol/LNaCl、5 mmol/L FeSO₄·7H₂O、20 mmol/L TCEP、濃度2%的OTG、濃度1%的Tween 80、5 mmol/LDTT、50mmol/L pH 8.0的Tricine/KOH緩沖液；其中，所述催化劑的濃度為4U/mL，底物濃度為1000 mg/L。