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一種真菌硫氧還蛋白的多肽、編碼序列及制備方法和應用

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2022-01-19
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN200910060873.0 
  • 技術(專利)名稱 一種真菌硫氧還蛋白的多肽、編碼序列及制備方法和應用 
  • 項目單位 武漢大學
  • 發(fā)明人 孫慧,梁一,陳義杰,劉洪洪,欒榮,車濤,姜帥 
  • 行業(yè)類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 朱紫渲
  • 發(fā)布時間 2022-01-19  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明公開了一種真菌硫氧還蛋白的多肽、編碼序列及制備方法和應用。該分離多肽的編碼序列為SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步驟是,首先是提取楊樹菇的總RNA為模板,通過RT-PCR得到cDNA第一鏈為模板,通過PCR擴增,得到PCR產物;其次是酶切得到PCR產物和原核表達載體,構建重組表達載體;第三是將得到的重組表達載體轉化大腸桿菌宿主細胞,得到表達楊樹菇硫氧還蛋白的重組細胞;第四是將得到的重組細胞誘導培養(yǎng)過夜獲得飽和培養(yǎng)物;等五是利用Ni親和層析法純化蛋白,分離,純化在重組細胞中表達的多肽。多肽作為制備治療或預防腫瘤疾病藥中的應用。涉及的蛋白質具有抗腫瘤活性。在開發(fā)抗腫瘤藥物方面有很大的應用價值。
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  • 02

    說明書

    1.一種分離的編碼真菌硫氧還蛋白的核苷酸,其序列為SEQ?ID?NO.1所示核苷酸序列。2.一種分離的多肽,其序列為SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列。3.權利要求2所述的一種真菌硫氧還蛋白的多肽制備方法,它包括下列步驟:A、提取楊樹菇的總RNA或mRNA為模板,通過RT-PCR得到cDNA第一鏈,以此鏈為PCR模板,擴增得到序列為SEQ?ID?NO.1所示的全長序列;B.酶切步驟A得到的序列和原核表達載體,構建重組表達載體;C、將步驟B中得到的重組表達載體轉化大腸桿菌宿主細胞,形成表達楊樹菇硫氧還蛋白的重組細胞;D、將步驟C中得到的重組細胞在37℃培養(yǎng)過夜獲得飽和培養(yǎng)物,將50μL飽和培養(yǎng)物接種于5mL含氨芐青霉素100μg/mL的培養(yǎng)基中,于37℃培養(yǎng)2小時,取1mL培養(yǎng)物轉移至微量離心管中,加異丙基硫代半乳糖苷IPTG至終濃度為1mmol/L,對培養(yǎng)物進行誘導,誘導10小時;E、利用Ni2+親和層析法純化蛋白,分離,純化步驟D中在重組細胞中表達的多肽。4.權利要求2所述的一種分離的多肽在制備治療或預防宮頸癌藥物中的應用。5.權利要求2所述的一種分離的多肽在制備治療或預防胃癌藥物中的應用。6.權利要求2所述的一種分離的多肽在制備治療或預防乳腺癌藥物中的應用。7.權利要求2所述的一種分離的多肽在制備治療或預防直腸癌藥物中的應用。8.權利要求2所述的一種分離的多肽在制備治療或預防前列腺癌藥物中的應用。9.權利要求2所述的一種分離的多肽在制備治療或預防肝癌藥物中的應用。
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專利技術附圖

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