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一種制備異源四聚體α2β2型藍藻PDHc E1方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:2024-07-10至2024-07-10
  • 發(fā)布日期:2024-07-10
  • 技術成熟度:可以量產(chǎn)
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號  
  • 技術(專利)名稱 一種制備異源四聚體α2β2型藍藻PDHc E1方法 
  • 項目單位
  • 發(fā)明人  
  • 行業(yè)類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 可以量產(chǎn)
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 陳先生
  • 發(fā)布時間 2024-07-10  
  • 01

    項目簡介

    該成果涉及基因工程和酶工程技術領域,提供了一種制備異源四聚體α2β2型藍藻PDHc E1的方法,包括:先分別制備藍藻丙酮酸脫氫酶PDHc E1的α亞基和β亞基所對應的DNA片段,然后將α亞基對應的DNA片段和β亞基對應的DNA片段分別克隆到pETDuet?1載體的多克隆位點1區(qū)域和多克隆位點2區(qū)域,獲得重組質粒pETDuet?1?α?β;再將重組質粒pETDuet?1?α?β和伴侶蛋白表達質粒pGro7共轉化到同一宿主細胞中,得到pETDuet?1?α?β?pGro7重組宿主細胞;最后進行通過宿主細胞的培養(yǎng),蛋白誘導表達,菌體收集,超聲波破碎等蛋白表達分離純化流程,即可獲得異源四聚體α2β2型藍藻PDHc E1。該成果提供的制備方法不受生物組織的限制,操作簡單、高效、制備成本低,獲得的藍藻PDHc E1產(chǎn)量高、純度高、活性高。


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  • 02

    說明書

    該成果涉及基因工程和酶工程技術領域,提供了一種制備異源四聚體α2β2型藍藻PDHc E1的方法,包括:先分別制備藍藻丙酮酸脫氫酶PDHc E1的α亞基和β亞基所對應的DNA片段,然后將α亞基對應的DNA片段和β亞基對應的DNA片段分別克隆到pETDuet?1載體的多克隆位點1區(qū)域和多克隆位點2區(qū)域,獲得重組質粒pETDuet?1?α?β;再將重組質粒pETDuet?1?α?β和伴侶蛋白表達質粒pGro7共轉化到同一宿主細胞中,得到pETDuet?1?α?β?pGro7重組宿主細胞;最后進行通過宿主細胞的培養(yǎng),蛋白誘導表達,菌體收集,超聲波破碎等蛋白表達分離純化流程,即可獲得異源四聚體α2β2型藍藻PDHc E1。該成果提供的制備方法不受生物組織的限制,操作簡單、高效、制備成本低,獲得的藍藻PDHc E1產(chǎn)量高、純度高、活性高。


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