1.一種快速檢測氯霉素的電化學適配體傳感器,所述電化學適配體傳感器含有ACT
TCA GTG AGT TGT CCC ACG GTC GGC GAG TCG GTG GTA G堿基序列的適配體,且該堿基系
列的5’端修飾了SH-(CH2)6,其特征在于:所述電化學適配體傳感器是適配體與納米復合物
上的銀納米粒子通過銀硫鍵固定在玻碳電極上組裝而成,所述納米復合物是由聚二烯二甲
基氯化銨(PDDA)功能化的還原石墨烯表面靜電組裝銀納米粒子制成,樣品中的氯霉素被定
量捕捉到傳感器表面,在納米復合物的催化作用下產生電信號;
上述電化學適配體傳感器在制備時,包括以下步驟:
①聚二烯二甲基氯化銨(PDDA)的還原石墨烯(rGO)的制備
(1)將25mg的氧化石墨烯(GO)置于25mL水中,超聲分散至溶液中無顆粒物,得到1mg/mL
的氧化石墨烯(GO)分散液;
(2)向上述分散液中加入0.5mL 20%聚二烯二甲基氯化銨(PDDA)電解質,攪拌30min后
加入0.875mL的35%水合肼溶液,在100℃的油浴攪拌24h后離心分離,沉淀用水洗至中性后
分散于25mL的水中,得到1mg/mL的聚二烯二甲基氯化銨(PDDA)的還原石墨烯(rGO);
②還原石墨烯銀納米粒子(rGO/AgNPs)復合物的制備
(1)將0.25mL 100mM的硝酸銀溶液和0.25mL 100mM的檸檬酸三鈉溶液加入到室溫下正
在攪拌的100mL的水中,加入6mL 新配置的5mM的硼氫化鈉溶液并劇烈攪拌,得到黃色膠體
銀納米粒子后繼續攪拌30min,靜置過夜;
(2)取0.5mL 1mg/mL的還原石墨烯(rGO)與4mL上述銀納米粒子室溫下攪拌1h后離心分
離,沉淀用水洗滌2-3次,得到1mg/mL的還原石墨烯銀納米粒子(rGO/AgNPs)復合物;
③電化學適配體傳感器的制備
(1)將玻碳電極使用0.3μm和0.05μm的氧化鋁拋光粉上打磨,在水和乙醇中交替超聲至
電極表面光滑;取4μL 0.5mg/mL的還原石墨烯銀納米粒子(rGO/AgNPs)復合物滴在玻碳電
極上自然晾干;
(2)取10μL 5μM的氯霉素適配體滴在電極上,所述適配體中含有5mM 三(2-羧乙基)膦
鹽酸鹽(TCEP)活化巰基,將電極在4℃下培育16h,用10mM的三羥甲基氨基甲烷酸鹽緩沖液
(Tris-HCl)洗去多余的適配體,滴加10μL 1mM 的巰基己醇進行活性位點的封閉1h,用10mM
的三羥甲基氨基甲烷酸鹽緩沖液(Tris-HCl)洗去多余的巰基己醇,在氮氣的環境下晾干電
極即得電化學適配體傳感器,將制好的電化學適配體傳感器置于4℃保存待用。
2.如權利要求1所述的一種快速檢測氯霉素的電化學適配體傳感器檢測氯霉素的方
法,其特征在于包括以下步驟:
(1)在制成的電化學適配體傳感器上,滴加不同濃度的氯霉素溶液,每次滴加10μL,在
37℃下溫育40 min后用10mM的三羥甲基氨基甲烷酸鹽緩沖液(Tris-HCl)洗凈;
(2)將上述電化學適配體傳感器作為工作電極,Ag/AgCl作為參比電極,鉑柱電極作為
對電極,連接到電化學工作站上;
(3)將上述電化學適體傳感器置于含有0.1 M氯化鉀的50mM pH 7.4三羥甲基氨基甲烷
酸鹽緩沖液(Tris-HCl)檢測溶液中,于-0.10 V至-0.80 V電位范圍進行線性掃描伏安測
定,掃速為50mV /s,根據記錄的電化學信號建立還原峰電流與氯霉素濃度之間的工作曲
線,根據工作曲線得出樣品中氯霉素的濃度。
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