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一種快速檢測氯霉素的電化學適配體傳感器

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-22
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610506537.4 
  • 技術(專利)名稱 一種快速檢測氯霉素的電化學適配體傳感器 
  • 項目單位 湖北師范大學
  • 發明人 賴國松,劉順,張海麗,俞愛民 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 韓佳憶
  • 發布時間 2021-07-22  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種快速檢測氯霉素的電化學適配體傳感器,所述電化學適配體傳感器是適配體與納米復合物上的銀納米粒子通過銀硫鍵固定在玻碳電極上組裝而成,樣品中的氯霉素被定量捕捉到傳感器表面,在納米復合物的催化作用下產生電信號;本發明的電化學適配體傳感器具有靈敏度高、響應快、操作簡便、成本低廉,選擇性好,對推廣適配體傳感器在醫藥分析、食品安全等方面的實際應用具有重要的意義。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種快速檢測氯霉素的電化學適配體傳感器,所述電化學適配體傳感器含有ACT
    TCA GTG AGT TGT CCC ACG GTC GGC GAG TCG GTG GTA G堿基序列的適配體,且該堿基系
    列的5’端修飾了SH-(CH2)6,其特征在于:所述電化學適配體傳感器是適配體與納米復合物
    上的銀納米粒子通過銀硫鍵固定在玻碳電極上組裝而成,所述納米復合物是由聚二烯二甲
    基氯化銨(PDDA)功能化的還原石墨烯表面靜電組裝銀納米粒子制成,樣品中的氯霉素被定
    量捕捉到傳感器表面,在納米復合物的催化作用下產生電信號;
    上述電化學適配體傳感器在制備時,包括以下步驟:
    ①聚二烯二甲基氯化銨(PDDA)的還原石墨烯(rGO)的制備
    (1)將25mg的氧化石墨烯(GO)置于25mL水中,超聲分散至溶液中無顆粒物,得到1mg/mL
    的氧化石墨烯(GO)分散液;
    (2)向上述分散液中加入0.5mL 20%聚二烯二甲基氯化銨(PDDA)電解質,攪拌30min后
    加入0.875mL的35%水合肼溶液,在100℃的油浴攪拌24h后離心分離,沉淀用水洗至中性后
    分散于25mL的水中,得到1mg/mL的聚二烯二甲基氯化銨(PDDA)的還原石墨烯(rGO);
    ②還原石墨烯銀納米粒子(rGO/AgNPs)復合物的制備
    (1)將0.25mL 100mM的硝酸銀溶液和0.25mL 100mM的檸檬酸三鈉溶液加入到室溫下正
    在攪拌的100mL的水中,加入6mL 新配置的5mM的硼氫化鈉溶液并劇烈攪拌,得到黃色膠體
    銀納米粒子后繼續攪拌30min,靜置過夜;
    (2)取0.5mL 1mg/mL的還原石墨烯(rGO)與4mL上述銀納米粒子室溫下攪拌1h后離心分
    離,沉淀用水洗滌2-3次,得到1mg/mL的還原石墨烯銀納米粒子(rGO/AgNPs)復合物;
    ③電化學適配體傳感器的制備
    (1)將玻碳電極使用0.3μm和0.05μm的氧化鋁拋光粉上打磨,在水和乙醇中交替超聲至
    電極表面光滑;取4μL 0.5mg/mL的還原石墨烯銀納米粒子(rGO/AgNPs)復合物滴在玻碳電
    極上自然晾干;
    (2)取10μL 5μM的氯霉素適配體滴在電極上,所述適配體中含有5mM 三(2-羧乙基)膦
    鹽酸鹽(TCEP)活化巰基,將電極在4℃下培育16h,用10mM的三羥甲基氨基甲烷酸鹽緩沖液
    (Tris-HCl)洗去多余的適配體,滴加10μL 1mM 的巰基己醇進行活性位點的封閉1h,用10mM
    的三羥甲基氨基甲烷酸鹽緩沖液(Tris-HCl)洗去多余的巰基己醇,在氮氣的環境下晾干電
    極即得電化學適配體傳感器,將制好的電化學適配體傳感器置于4℃保存待用。
    2.如權利要求1所述的一種快速檢測氯霉素的電化學適配體傳感器檢測氯霉素的方
    法,其特征在于包括以下步驟:
    (1)在制成的電化學適配體傳感器上,滴加不同濃度的氯霉素溶液,每次滴加10μL,在
    37℃下溫育40 min后用10mM的三羥甲基氨基甲烷酸鹽緩沖液(Tris-HCl)洗凈;
    (2)將上述電化學適配體傳感器作為工作電極,Ag/AgCl作為參比電極,鉑柱電極作為
    對電極,連接到電化學工作站上;
    (3)將上述電化學適體傳感器置于含有0.1 M氯化鉀的50mM pH 7.4三羥甲基氨基甲烷
    酸鹽緩沖液(Tris-HCl)檢測溶液中,于-0.10 V至-0.80 V電位范圍進行線性掃描伏安測
    定,掃速為50mV /s,根據記錄的電化學信號建立還原峰電流與氯霉素濃度之間的工作曲
    線,根據工作曲線得出樣品中氯霉素的濃度。
    展開

專利技術附圖

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