本發(fā)明公開了一種以葡萄糖酸作唯一碳源進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)細(xì)菌纖維素的優(yōu)化方法，步驟如下：確定木醋桿菌以葡萄糖酸作唯一碳源需要考慮的發(fā)酵參數(shù)，所述發(fā)酵參數(shù)包括發(fā)酵液pH、氣液比以及接種量；利用Design Expert8.0.6.1軟件根據(jù)Box?Behnken Design確定實(shí)驗(yàn)方案；按照所確定的Box?Behnken Design實(shí)驗(yàn)方案完成各組實(shí)驗(yàn)，得到對(duì)應(yīng)的各組細(xì)菌纖維素產(chǎn)量；根據(jù)各組細(xì)菌纖維素的產(chǎn)量，采用Design Expert8.0.6.1軟件建立響應(yīng)面模型，確定優(yōu)化的發(fā)酵參數(shù)組合。本發(fā)明提高了葡萄糖酸的利用率從而提高葡萄糖利用率，進(jìn)而提高了細(xì)菌纖維素最終產(chǎn)量，對(duì)于減少資源浪費(fèi)、降低發(fā)酵成本有很大意義。

1.一種以葡萄糖酸作唯一碳源進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)細(xì)菌纖維素的優(yōu)化方法，其特征在于，步
驟如下：
步驟1，確定木醋桿菌以葡萄糖酸作唯一碳源需要考慮的發(fā)酵參數(shù)，所述發(fā)酵參數(shù)包括
發(fā)酵液pH、氣液比以及接種量；
步驟2，利用Design Expert8.0.6.1軟件根據(jù)Box-Behnken Design確定實(shí)驗(yàn)方案；
步驟3，按照步驟2所確定的Box-Behnken Design實(shí)驗(yàn)方案完成各組實(shí)驗(yàn)，得到對(duì)應(yīng)的
各組細(xì)菌纖維素產(chǎn)量；
步驟4，根據(jù)各組細(xì)菌纖維素的產(chǎn)量，采用Design Expert8.0.6.1軟件建立響應(yīng)面模
型，確定優(yōu)化的發(fā)酵參數(shù)組合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以葡萄糖酸作唯一碳源進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)細(xì)菌纖維素的優(yōu)化方
法，其特征在于，步驟1所述發(fā)酵參數(shù)的范圍如下：發(fā)酵液pH為4.60~6.60，氣液比為13.30%~
20.00%，接種量為8.00%~25.00%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以葡萄糖酸作唯一碳源進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)細(xì)菌纖維素的優(yōu)化方
法，其特征在于，步驟3所述按照步驟2所確定的Box-Behnken Design實(shí)驗(yàn)方案完成各組實(shí)
驗(yàn)，得到對(duì)應(yīng)的各組細(xì)菌纖維素產(chǎn)量，具體如下：
(3.1)根據(jù)步驟2中的實(shí)驗(yàn)方案，配制所需種子培養(yǎng)液，滅菌冷卻完成接種操作后，搖
床30℃下恒溫培養(yǎng)3天，搖床轉(zhuǎn)速為160 r/min；
(3.2)根據(jù)步驟2中的實(shí)驗(yàn)方案，配制所需發(fā)酵培養(yǎng)液，分別分裝至各個(gè)錐形瓶中，調(diào)至
各所需pH，滅菌冷卻后，按照步驟2實(shí)驗(yàn)方案中數(shù)據(jù)，分別取相應(yīng)體積的接種量于對(duì)應(yīng)發(fā)酵
液中，于搖床30℃下恒溫培養(yǎng)5天來(lái)發(fā)酵細(xì)菌纖維素，搖床轉(zhuǎn)速為160 r/min；
(3.3)對(duì)步驟(3.2)中由木醋桿菌發(fā)酵生成的細(xì)菌纖維素膜或團(tuán)塊取出后，先用自來(lái)水
沖洗，再浸泡于85℃的3‰的NaOH溶液中煮2 h，然后用4‰的HAc溶液中和，最后用去離子水
漂洗直至溶液成中性為止，然后將細(xì)菌纖維素膜和團(tuán)塊置于冷凍干燥下冷凍10小時(shí)，最后
置于80℃烘箱中干燥至恒重，于室溫稱重得到對(duì)應(yīng)的各組細(xì)菌纖維素產(chǎn)量。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以葡萄糖酸作唯一碳源進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)細(xì)菌纖維素的優(yōu)化方
法，其特征在于，步驟4所確定優(yōu)化的發(fā)酵參數(shù)組合為：發(fā)酵液pH=5.65，氣液比=20.00%，接
種量=16.72%。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的以葡萄糖酸作唯一碳源進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)細(xì)菌纖維素的優(yōu)化方
法，其特征在于，步驟(3.1)中所述種子培養(yǎng)液為葡萄糖2.0%、(NH₄)₂SO₄0.6%、KH₂PO₄0.1%、
MgSO₄0.04%、蛋白胨0.3%、酵母浸粉0.225%、羧甲基纖維素鈉0.04%。