本發明涉及葡萄糖代謝脫阻遏、高產蝦青素的法夫酵母突變株MK19及其培養方法。采用Co誘變篩選方法由法夫酵母野生型試驗菌株得到本發明的法夫酵母突變株MK19，該法夫酵母突變株MK19經過固體種子活化、液體種子活化與發酵培養得到所述突變株MK19的發酵液。本發明的法夫酵母突變株MK19細胞密度達OD600＝32，蝦青素含量為918.53μg/g，因此，該突變株細胞內蝦青素含量是野生型菌株的22倍。此外，該菌株營養成分要求簡單，培養基成本低廉，工業上應用可以簡化蝦青素生產工藝，縮短法夫酵母的生產周期，從而減少成本。

1.一種葡萄糖代謝脫阻遏、高產蝦青素的法夫酵母(Phaffia
rhodozyma)突變株MK19，其保藏編號為CGMCC?No.3445。
2.根據權利要求1所述的葡萄糖代謝脫阻遏、高產蝦青素的法夫酵
母突變株MK19的培養方法，其特征在于該方法的步驟如下：
A、PDA固體斜面培養基配制如下：200g馬鈴薯經洗凈去皮切碎后，
加水1000ml煮沸半個小時，用紗布過濾，其濾液再加20g葡萄糖，混勻
后用去離子水補充液體體積至1000ml，在溫度115℃下滅菌15分鐘，得
到PDA液體培養基，往該PDA液體培養基中加入15g瓊脂，待瓊脂溶解、
凝固后得到PDA固體培養基；
B、配制液體種子培養基：將36-44g葡萄糖、3.6-4.4g酵母粉、2.0-2.8g
尿素、1.6-2.2g磷酸二氫鉀、0.4-0.6g硫酸鎂七水合物溶解于蒸餾水，定溶
至1000ml，調節pH至5.8-6.2；
C、配制液體低糖發酵培養基：將36-44g葡萄糖、3.6-4.4g酵母粉、
0.4-0.8g尿素、1.6-2.2g磷酸二氫鉀、0.4-0.6g硫酸鎂七水合物溶解于蒸餾
水，定溶至1000ml，調節pH至5.8-6.2；
D、配制液體高糖發酵培養基：將100-120g葡萄糖、3.6-4.4g酵母粉、
0.4-0.8g尿素、1.6-2.2g磷酸二氫鉀、0.4-0.6g硫酸鎂七水合物溶解于蒸餾
水，定溶至1000ml，調節pH至5.8-6.2；
E、培養條件與方法
(1)固體種子活化：將含有篩選突變株MK19的菌液涂布在步驟(A)
制備的PDA固體培養基平板上，在溫度21-25℃下進行斜面培養3-7天，
然后置于溫度3-5℃下保存；
從PDA斜面挑取菌苔接種至新鮮PDA斜面上，再在溫度24-26℃培
養3～7天，得到活化突變株MK19固體種子；
(2)液體種子活化：從上述(1)得到的活化突變株MK19固體種子挑
取兩環菌苔轉移到在步驟(B)制備的液體種子培養基中，在溫度24-26℃及
搖床振蕩速度180-220rpm下培養3天；得到的液體種子再以所述的液體
種子培養基體積計按照8-10％接種量加到所述的液體培養基中，在溫度
24-26℃與振蕩速度180-220rpm下培養35-40小時；采用紫外分光光度法
測定該培養液的OD值為9-12；
(3)發酵培養：上述(2)得到的活化液體種子以所述的低糖或高糖發
酵培養基體積計按照5-7％接種量接種至所述的低糖或高糖發酵培養基
中，在溫度24-26℃與振蕩速度200-240rpm下培養4-5天，得到所述突變
株MK19的發酵液。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于將40g葡萄糖、4.0g酵
母粉、2.4g尿素、2.0g磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂七水合物溶于蒸餾水中，
并定容至1000ml，制備得到所述的液體種子培養基。
4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于將40g葡萄糖、4.0g酵
母粉、0.6g尿素、2.0g磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂七水合物溶于蒸餾水，并
定容至1000ml中，制備得到所述的液體低糖發酵培養基。
5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于將100g葡萄糖、4.0g酵
母粉、0.6g尿素、2.0g磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂七水合物溶于蒸餾水中，
并定容至1000ml，制備得到所述的液體高糖發酵培養基。
6.根據權利要求2-5中任一權利要求所述的方法，其特征在于所述
突變株MK19發酵液的蝦青素含量是20-30mg/L。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于所述的蝦青素含量是采
用高壓液相色譜法檢測的。