黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法及其用途，屬于提取分離技術領域。以黃秋葵果實為原料，采用滲漉提取、閃蒸濃縮、萃取脫色、醇沉轉移出多糖及果膠，繼續真空濃縮、通過大孔吸附樹脂柱分離富集、再結合凝膠樹脂柱色譜技術從中分離得到5,7,3′,4′-四羥基-4′′-O-甲基-3-O-β-D-葡萄糖黃酮苷和5,7,3′,4′-四羥基-3-O-[β-D-葡萄糖基-(1→2)]-β-D-葡萄糖黃酮苷兩個單體化合物，提取率分別為3.62％～8.66%和8.01％～12.98%，純度均達到95％以上。本發明工藝簡單、生產成本低，制得的兩個黃酮苷具有很好抗氧化及抑菌活性。

1.黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法，其特征在于包括以下步驟：1）原料的處理：取黃秋葵嫩果，以橫段面切片后曬干或風干，備用；2）滲漉提?。簩⒏稍锏钠瑺铧S秋葵果實裝入滲漉筒中，用折合黃秋葵干燥果實1～2倍量的40％～70％含水乙醇浸潤4~6小時后裝入滲漉桶中，用折合黃秋葵干燥果實10～18倍量的50％～70％含水乙醇進行滲漉提取，調節流速，以8~15?mL/min流速收集滲漉提取液；3）閃蒸濃縮：將滲漉提取液在水浴溫度60～70℃，真空度為0.090?Mpa～0.095?Mpa的條件下采用真空薄膜濃縮裝置進行閃蒸濃縮，調節待濃縮液的進液速度，以150～350?mL?·?min^-1的流量反復濃縮，得到折合每毫升濃縮液含0.5～1.0克原藥材的濃縮液；4）脫色除雜處理：將濃縮液用石油醚萃取脫色除雜3～4次，每次用量為濃縮液與石油醚的體積比為1:1～1:3，將石油醚萃取液合并后進行真空濃縮，回收石油醚，萃取脫色后得到的濃縮液備用；5）醇沉轉移出多糖與果膠：在上述濃縮液中加入95％的工業酒精調整至濃縮液中乙醇濃度達到70％～80％，放置過夜，析出多糖與果膠沉淀，將沉淀物轉移出去另行利用，得到除糖后的濃縮液；6）繼續真空濃縮：得到除糖后的濃縮液繼續在50℃以下真空閃蒸濃縮，得到折合每毫升濃縮液含1.5～2.0克原藥材的濃縮液；7）大孔樹脂分離富集：得到的濃縮液通過Diaion?HP-20大孔吸附樹脂柱色譜分離富集，然后先用H₂O洗脫，再依次用10%～70%含水甲醇或含水乙醇進行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液，合并20%~60%含水甲醇或含水乙醇部位的洗脫液，將合并的洗脫液在50℃以下真空閃蒸濃縮，得到洗脫濃縮液；8）凝膠樹脂分離純化：將上述合并的洗脫濃縮液繼續通過Toyopearl?HW-40柱色譜，以H₂O、20%?含水甲醇或含水乙醇、40%含水甲醇或含水乙醇、60%含水甲醇或含水乙醇、70%丙酮梯度洗脫；9）步驟8）中20%?含水甲醇或含水乙醇洗脫部位減壓濃縮干燥后，溶于少量水后通過MCI?gel?CHP-20?P柱色譜，以H₂O及不同濃度的含水甲醇或含水乙醇梯度洗脫，TLC檢識，相同流分合并，得化合物2的淺黃色結晶；10）步驟8）中40%?含水甲醇或含水乙醇部位通過Sephadex?LH-20柱色譜，以水及不同濃度的含水甲醇梯度洗脫，TLC檢識，相同流分合并，得化合物1的淺黃色粗品；所述的化合物1為5,7,3′,4′-四羥基-4′′-O?-甲基-3-O-β-D-葡萄糖黃酮苷，其結構式為：；所述的化合物2為5,7,3′,4′-四羥基-3-O-[β-D-葡萄糖基-(1→6)]-β-D-葡萄糖黃酮苷，其結構式為：。2.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟2）中：浸潤所用的含水乙醇濃度為45％～65％，滲漉提取時所用的含水乙醇濃度為55％～65％，滲漉提取時流速為10~14mL/min。3.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟2）中：浸潤所用的含水乙醇濃度為50％～60％，滲漉提取時所用的含水乙醇濃度為58％～60％，滲漉提取時流速為11~12?mL/min。4.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟3）中：進液速度為200～300?mL?·?min^-1。5.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟3）中：進液速度為220～260?mL?·?min^-1。6.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟4）中：濃縮液與石油醚的體積比為1:1～1:2。7.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟7）中：先用H₂O洗脫，再依次用10%含水甲醇或含水乙醇、20%含水甲醇或含水乙醇、40%含水甲醇或含水乙醇、60%含水甲醇或含水乙醇、70%含水甲醇或含水乙醇進行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液，合并20%含水甲醇或含水乙醇、40%含水甲醇或含水乙醇、60%含水甲醇或含水乙醇部位的洗脫液。