本發明所涉及的一種特異檢測鴨黃病毒感染的熒光定量PCR快速診斷試劑盒及其應用方法，試劑盒包括：a)RNA裂解液、b)熒光定量反應液、c)鴨黃病毒強陽性質控品、d)陰性質控品，熒光定量反應液含有上游引物DFV-F和下游引物DFV-R以及熒光探針DFV-P，適用于臨床及科研中對鴨黃病毒的快遞定量檢測。本發明具有以下優點：特異性好,通過引物高特異性擴增和熒光探針的高特異雜交雙重控制,具有很高的準確性,假陽性低；靈敏度高；檢測速度快，僅2小時，加上核酸的提取，共需3小時左右；沒有后處理，不用雜交、電泳、拍照等過程，不產生污染。

1.一種特異檢測鴨黃病毒感染的熒光定量RT-PCR快速診斷試劑盒，其特征在于該試劑盒包括：a)RNA裂解液、b)熒光定量反應液、c)鴨黃病毒強陽性質控品、d)陰性質控品，熒光定量反應液含有上游引物DFV-F和下游引物DFV-R?以及熒光探針DFV-P，上游引物?DFV-F序列為:??atgaataaggtggtgaaggtaatgc?25nt；下游引物DFV-R序列為：?cagattcgtgaaagtgttgagagc?24nt；熒光探針DFV-P序列為：??catgactgttttcccatcacgtcccgg?27nt，熒光探針DFV-P?5＇端標記的是熒光報告基團FAM，3＇端標記的是熒光淬滅基團TAMRA。2.按權利要求1所述的特異檢測鴨黃病毒感染的熒光定量RT-PCR快速診斷試劑盒，其特征在于熒光定量反應液由1×PCR?Buffer,?MgCl_2?4mM,?dNTPs?0.5mM,?M-MLV酶50U?,Taq酶2U，上游引物DFV-F和下游引物DFV-R為各0.2μM,熒光探針DFV-P?為0.2μM組成。3.按權利要求1所述的特異檢測鴨黃病毒感染的熒光定量RT-PCR快速診斷試劑盒，其特征在于所述的鴨黃病毒強陽性質控品為高滴度的鴨黃病毒監利株，其在鴨胚上增殖，經滅活后得到，經測量ELD₅₀為10^3.7/mL。4.按權利要求1所述的特異檢測鴨黃病毒感染的熒光定量RT-PCR快速診斷試劑盒，其特征在于所述的陰性質控品是采集健康的且無病原的鴨組織，按體積比1:5加入PBS液，充分勻漿破碎，離心去除沉淀，上清保存備用。