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菊花滑刃線蟲的檢測(cè)方法及診斷試劑盒

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-06-18
  • 技術(shù)成熟度:已有樣品
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào) CN200910037299.7 
  • 技術(shù)(專利)名稱 菊花滑刃線蟲的檢測(cè)方法及診斷試劑盒 
  • 項(xiàng)目單位 崔汝強(qiáng)
  • 發(fā)明人 崔汝強(qiáng),劉中勇,胡學(xué)難,鐘國(guó)強(qiáng),趙立榮,馮黎霞,孫曉棠,吳海榮,胡佳 
  • 行業(yè)類別 中藥材獲取-動(dòng)植物采集
  • 技術(shù)成熟度 已有樣品
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 秦子家
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-06-18  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明公開了一種菊花滑刃線蟲的檢測(cè)方法,該方法使用序列表中的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2作為引物對(duì),進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),通過電泳分析可得知是否得到特異性片段,從而檢測(cè)或鑒定出是否為菊花滑刃線蟲。另外,本發(fā)明還提供了診斷菊花滑刃線蟲的試劑盒,該試劑盒包含上述的引物對(duì)。本發(fā)明的方法和試劑盒具有很高的可靠性和靈敏度,且操作方便,不依賴操作人員的經(jīng)驗(yàn),準(zhǔn)確度高,實(shí)用性強(qiáng),可滿足農(nóng)作物種植前和植物檢疫過程中對(duì)菊花滑刃線蟲快速可靠的檢測(cè)和鑒定需要。
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  • 02

    說明書

    1.一種檢測(cè)菊花滑刃線蟲(Aphelenchoides??ritzemabosi)的方法,其包括:(a)從可疑植物材料或土樣中分離出待檢測(cè)線蟲,提取DNA;(b)以步驟(a)中獲得的DNA為模板,使用SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2的引物對(duì),進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),得到擴(kuò)增產(chǎn)物;(c)檢測(cè)步驟(b)中獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果判斷菊花滑刃線蟲的存在。2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,當(dāng)所述可疑植物材料或土樣中存在大量線蟲時(shí),采用酚氯仿提取法提取DNA。3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,當(dāng)所述可疑植物材料或土樣只存在單條線蟲時(shí),步驟(a)中所述的提取包括以下步驟:(1)將單條線蟲加入含有WLB溶液的管中;(2)于-70℃放置30-60?min;95℃放置15-20?min;55-65℃放置2min;(3)再加入蛋白酶K,55-65℃處理30?min-2?h;95℃處理15-20min,以獲得作為單條線蟲DNA模板的產(chǎn)物。4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述植物材料為菊科植物材料、茄科植物材料或罌粟科植物材料。5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述植物材料為煙草、草莓、珠蘭、百合、蒲包花、飛燕草或夾竹桃的種苗或植株。6.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于,步驟(c)中所述檢測(cè)步驟(b)中獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物的方法為電泳檢測(cè)。7.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述菊科植物為翠菊、金光菊、大麗菊或百日草。8.一種用于診斷菊花滑刃線蟲病的試劑盒,其包含SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2的引物對(duì)。
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專利技術(shù)附圖

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