福利一区二区三区视频在线观看-福利一区三区-福利一区视频-福利在线网址-妇女激情毛片-干干干操操操

您現在的位置: 首頁 > 技術轉讓 > 高效裂解串聯基因,高效裂解質粒及構建方法和應用

高效裂解串聯基因,高效裂解質粒及構建方法和應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-26
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310030717.6 
  • 技術(專利)名稱 高效裂解串聯基因,高效裂解質粒及構建方法和應用 
  • 項目單位 山東省農業科學院畜牧獸醫研究所
  • 發明人 王金寶,張玉玉,吳家強,王可,杜以軍,李俊,于江,彭軍 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 韓夢蕊
  • 發布時間 2021-07-26  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及基因工程領域,特別涉及一種由噬菌體PhiX174突變裂解基因mE和葡萄球菌核酸酶A基因SNA組成的高效裂解串聯基因,基因序列如序列表中序列3所示。含有上述高效裂解串聯基因的高效裂解質粒。高效裂解質粒在制備菌蛻中的應用。本發明構建的安全高效的裂解質粒pBV-mELS能夠在大腸桿菌菌液OD值達到1.0以上時進行誘導,裂解效率可到達99.99995%,不僅突破了裂解基因E介導的裂解過程依賴宿主細菌生長狀態(OD為0.4~0.6)的局限性,大大提高了菌蛻的產量,還能夠有效清除菌蛻中殘存的遺產物質,降低了危害性遺傳元件(抗生素抗性基因和病原決定簇基因)的側向傳播。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種高效裂解串聯基因,其特征是基因序列如序列表中序列3所示。2.根據權利要求1所述的高效裂解串聯基因,其特征是由噬菌體PhiX174突變裂解基因mE和葡萄球菌核酸酶A基因SNA串聯組成的。3.含有上述權利要求1或2所述的高效裂解串聯基因的高效裂解質粒。4.根據權利要求3所述的高效裂解質粒,其特征是將權利要求1或2所述的高效裂解串聯基因酶切插入pBV220載體中。5.一種權利要求3或4所述的高效裂解質粒的構建方法,其特征是包括以下步驟:(1)以噬菌體PhiX174?RFI?DNA為模板、以序列表中的序列4和序列5為引物進行PCR擴增,獲得突變裂解基因mE;(2)以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板、序列表中序列6和序列7為引物進行PCR擴增,獲得葡萄球菌核酸酶A基因;(3)將步驟(1)中得到的突變裂解基因mE和步驟(2)中得到的葡萄球菌核酸酶A基因作為下一步PCR反應的模板,用序列表中的序列4和序列7進行擴增,得到串聯基因;(4)將串聯基因應用EcoR?I和Sal?I限制性內切酶進行雙酶切,酶切產物與經EcoR?I和SalI雙酶切的pBV220載體連接,得到高效裂解質粒。6.根據權利要求5所述的構建方法,其特征是將步驟(4)得到的高效裂解質粒轉化大腸桿菌DH5α感受態細胞,30℃過夜培養16?h,挑取單菌落于氨芐青霉素抗性的LB培養基中30℃過夜振蕩培養,提取質粒,保留鑒定為陽性的質粒。7.一種權利要求3或4所述的高效裂解質粒在制備菌蛻中的應用。8.根據權利要求7所述的應用,其特征在于所述菌蛻為腸桿菌科的菌蛻。9.根據權利要求7所述的應用,其特征是包括以下步驟:(1)將含有所述高效裂解質粒的大腸桿菌DH5α在30℃培養至OD600值達到1.0-1.2;(2)培養溫度升高至42℃誘導高效裂解串聯基因的表達;(3)在升溫誘導90?min時添加終濃度為10mM的?CaCl2和1mM?的MgCl2,來激活SNA的活性;(4)升溫誘導4h時,收集步驟(3)獲得的菌蛻,洗滌后保存。
    展開

專利技術附圖

服務流程

過戶資料

  • 買賣雙方需提供資料
  • 平臺提供
  • 過戶后您將獲得
  • 買家
  • 賣家
  • 公司
  • 企業營業執照
  • 企業營業執照

    專利注冊證原件

  • 個人
  • 身份證

    個體戶營業執照

  • 身份證

    專利注冊證原件

  • 專利代理委托書

    轉讓申請書

    轉讓協議

  • 手續合格通知書

    專利證書

    專利利登記簿副本

安全保障

  • 品類齊全

    海量資源庫,平臺整合幾十萬閑置資源。
  • 交易保障

    完善的資金保障體系確保買賣雙方資金安全。
  • 專人跟進

    專業交易顧問全程服跟進,確保交易流暢。
  • 快速響應

    專業在線/電話客服服務,快速響應貼心服務。
  • 售后無憂

    資質過硬,國內大知識產權服務平臺。
  • -我要咨詢-
  • ×
聯系人:
專利名稱: *
聯系電話: *
驗證碼:

提交

關于我們 | 聯系我們

傳真:0435-3213171 電話:18801213919 郵箱:[email protected] 地址:吉林省通化市東昌區新華大街1003號(通化市科技成果轉化中心)


舉報電話:0435-5112631     舉報郵箱:[email protected]

備案號ICP備18003140號-1
主站蜘蛛池模板: 亚洲蜜桃av永久无码精品放毛 | 国产另类首页 | 国产成在线观看免费视 | 亚洲av中文无码乱人伦不卡顿 | 91精品视频免费看 | 国内自拍偷拍 | 99久久无码热高清精 | 国产精品熟女乱 | 国产偷窥一区二区三区 | 欧美日韩精品不卡在线播放 | 蜜臀久久99精品久久久久久做爰 | 亚洲国产精品成人午夜在线观看 | 无线乱码一二三区免费看久久 | 国产四虎精品无码不卡免费 | 在线免费观看毛片网站 | ww亚洲无码免费在线观看 | 丝袜美腿亚洲一区二区 | 2025国产免费自拍视频 | 色综合天天综合网国产成人网 | 国产乱理论在线观看 | 日韩国产精品无码一区二区三区 | 亚洲欧美中文日韩在线v日本 | 亚洲AV国产精品无码A片 | 国产精品乱伦一区二区 | 国产精品爽黄69天堂a片 | 欧美日韩国产免费一区二区三 | 亚洲国产私拍精品模在线 | 久久视频在线视频观看: | 高清国产中文字幕在线 | 91精品国产高清91久久久久 | 亚洲精品无码mⅴ在线观看 亚洲精品无码mv在线 | 成人国产精品一区二区小说 | 四虎国产精品免费久久 | 色妞精品av一区二区三区 | 亚洲一区久久国产 | 综合开心六月在线视频 | 国产精品日本免费视频 | 在线观看视频观看高清午夜 | 国产日韩精品一区二区在线播放 | 国产精品日韩精品久久密挑 | 亚洲精品无码成人A片在线小说 |