本發明公開了一種雄激素受體基因敲除試劑盒。本發明所述的雄激素受體基因敲除試劑盒包括：質粒AR?CAS9，其含有一段互補的DNA序列，該DNA序列能被轉錄為SEQ ID No:1所示的RNA序列，該RNA序列能形成特異識別雄激素受體基因的外顯子1部分序列的sgRNA，該sgRNA與trRNA構成特異的識別結構，從而引導CAS9酶特異地剪切雄激素受體基因的外顯子1對應序列；以及檢測試劑，用于檢測雄激素受體基因的外顯子1的剪切效果。本發明所述的雄激素受體基因敲除試劑盒可用于定向雄激素受體基因的敲除，具有效率高、速度快、簡單經濟的特點，在動物模型構建及醫學臨床應用方面前景廣闊。

1.一種雄激素受體基因敲除試劑盒，包括：
(1)質粒AR-CAS9，其含有一段互補的DNA序列，該DNA序列能被轉錄為SEQ ID No:1所示
的RNA序列，該RNA序列能形成特異識別雄激素受體基因的外顯子1部分序列的sgRNA，該
sgRNA與trRNA構成特異的識別結構，從而引導CAS9酶特異地剪切雄激素受體基因的外顯子
1對應序列；
(2)檢測試劑，用于檢測雄激素受體基因的外顯子1的剪切效果。
2.根據權利要求1所述的雄激素受體基因敲除試劑盒，其特征在于：所述互補的DNA序
列為SEQ ID No:2和SEQ ID No:3。
3.根據權利要求2所述的雄激素受體基因敲除試劑盒，其特征在于，所述質粒AR-CAS9
是用包括如下步驟的構建方法構建的：
以PX330質粒作為起始載體，先用Bbsl酶切并回收骨架；
設計合成SEQ ID No:2和SEQ ID No:3兩個帶有接頭的核苷酸序列，合成好后稀釋并退
火作為插入片段；
用T4DNA連接酶在16℃連接2小時將骨架和插入片段接上，連接產物的轉化，挑克隆測
序鑒定，篩選出表達質粒AR-CAS9。
4.根據權利要求1所述的雄激素受體基因敲除試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑為
PCR檢測試劑，包括用于擴增雄激素受體外顯子1剪切區序列的一對引物，正向引物和反向
引物的核苷酸序列分別如SEQ ID No:4和SEQ ID No:5所示。