本發(fā)明提供了一種人源iPS干細胞體外定向分化為神經(jīng)細胞的試劑盒及方法，利用本發(fā)明試劑盒所提供的培養(yǎng)液以及按照本發(fā)明方法可以使iPS干細胞高效地、定向地分化為神經(jīng)細胞。本發(fā)明的試劑盒和方法簡單可靠，穩(wěn)定高效，安全性高，多能干細胞向神經(jīng)細胞分化的比例明顯提高，其分化比例大于90％。同時，本發(fā)明的試劑盒和培養(yǎng)基適用于大規(guī)模生產(chǎn)高品質(zhì)的神經(jīng)細胞，無需后續(xù)的篩選和純化步驟，可以直接用于神經(jīng)發(fā)育科學研究，神經(jīng)疾病的細胞治療，神經(jīng)損傷的修復以及藥物篩選的應(yīng)用需求。

1.一種用于體外定向誘導多能干細胞分化為神經(jīng)細胞的試劑盒，所述試劑盒包括前期
培養(yǎng)液，所述前期培養(yǎng)液包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基DMEM/F12，進一步地，所述前期培養(yǎng)液還包括：
胰島素 4～11ug/ml；
2-磷酸抗壞血酸酯 40～70mg/ml；
亞硒酸鈉 40～80ug/ml；
人類堿性成纖維細胞生長因子 150～200ug/ml；
人類轉(zhuǎn)化生長因子TGFβ1 90～140ug/ml；
轉(zhuǎn)鐵蛋白 30～60mg/ml；
NaHCO₃ 4～8wt％；
其中所述前期培養(yǎng)液還包括：1～3μM TZV或8～12μM Y27632。
所述試劑盒還包括完全神經(jīng)誘導培養(yǎng)液，所述完全神經(jīng)誘導培養(yǎng)液包括神經(jīng)培養(yǎng)基底
液和神經(jīng)誘導補給液，其中所述神經(jīng)培養(yǎng)基底液和神經(jīng)誘導補給液的體積比為40:1～60:
1；
其中所述神經(jīng)培養(yǎng)基底液為PSC神經(jīng)培養(yǎng)基底液；
其中所述神經(jīng)誘導補給液為PSC神經(jīng)誘導補給液。
2.一種用于體外定向誘導多能干細胞分化為神經(jīng)細胞的方法，所述方法包括以下階
段：
第一階段：用預熱的如權(quán)利要求1所述的試劑盒中的前期培養(yǎng)液傳代培養(yǎng)即將用于定
向分化的多能干細胞；
第二階段：用預熱的如權(quán)利要求1所述的試劑盒中的完全神經(jīng)誘導培養(yǎng)液替換第一階
段所用的前期培養(yǎng)液，之后每24～48小時更換一次所述完全神經(jīng)誘導培養(yǎng)液，直至可以采
收。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，在第一階段中，所述多能干細胞以小團塊方式傳代。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，在第一階段中，還包括對用于傳代培養(yǎng)所述多能干細胞的
培養(yǎng)皿進行Geltrex預處理。
5.如權(quán)利要求2所述的方法，在第二階段中，還包括用無菌的移液管或移液器移除未神
經(jīng)分化的細胞群落。