本發(fā)明涉及生物和醫(yī)學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種在同一反應(yīng)體系內(nèi)同時綜合檢測子宮癌腫瘤標志物SCC、CEA、CA125、β-HCG的時間分辨熒光免疫檢測試劑盒，同時還涉及該試劑盒在綜合檢測子宮癌腫瘤標志物SCC、CEA、CA125、β-HCG中的應(yīng)用。該試劑盒包括：分別抗SCC、CEA、CA125、β-HCG第一株單克隆抗體混合抗體包被的微孔板；用Eu標記的抗SCC、Sm標記的抗CEA、Tb標記的抗CA125、Dy標記的抗β-HCG第二株單克隆抗體混合抗體；分析緩沖液；共用熒光增強劑；洗滌液；質(zhì)控品。本發(fā)明試劑盒可用于子宮癌的臨床輔助診斷、療效觀察及預(yù)后判斷，對子宮癌腫瘤的治療和預(yù)防具有重要意義，同時檢測四個腫瘤標志物，簡化了檢測步驟，提高了檢測數(shù)據(jù)綜合分析的特異性和靈敏性。

1.一種時間分辨熒光法綜合檢測子宮癌試劑盒，把四種子宮癌腫瘤標志
物SCC、CA125、CEA、β-HCG綜合在同一微孔的同一反應(yīng)體系內(nèi)，采用時
間分辨熒光免疫法檢測，其特征在于：該試劑盒包括：分別抗SCC、CA125、
CEA、β-HCG第一株單克隆抗體混合抗體包被的微孔板；用Eu³⁺標記的抗
SCC、Tb³⁺標記的抗CA125、Sm³⁺標記的抗CEA、Dy³⁺標記的抗β-HCG第二
株單克隆抗體混合抗體；分析緩沖液；共用熒光增強劑；洗滌液；質(zhì)控品；
所述的第一株單克隆抗體混合抗體包被的微孔板的制備方法為：把分別
抗SCC、CA125、CEA、β-HCG第一株單克隆抗體混合抗體用包被緩沖液稀
釋，制得抗體包被液，然后向微孔板的每個孔中分別加入100μl的所述抗體包
被液，于37℃包被2小時，然后用生理鹽水沖洗微孔板三次，然后再向微孔
板的每個孔中分別加入200μl的封板液，于室溫封閉2小時或置于4℃環(huán)境中
過夜，然后用生理鹽水沖洗微孔板兩次，冷凍干燥，制得第一株單克隆抗體
混合抗體包被的微孔板；
所述抗體包被液中，分別抗SCC、CA125、CEA、β-HCG的第一株單克
隆抗體的濃度均為0.009～0.018g/L；
所述的用Eu³⁺標記的抗SCC、Tb³⁺標記的抗CA125、Sm³⁺標記的抗CEA、
Dy³⁺標記的抗β-HCG第二株單克隆抗體混合抗體中，用Eu³⁺標記的抗SCC
抗體、Tb³⁺標記的抗CA125抗體、Sm³⁺標記的抗CEA抗體、Dy³⁺標記的抗β
-HCG抗體的質(zhì)量配比為：Eu³⁺標記的抗SCC抗體:Tb³⁺標記的抗CA125抗
體:Sm³⁺標記的抗CEA抗體:Dy³⁺標記的抗β-HCG抗體＝(5～10):(6～9):
(6～11):(11～15)；
所述共用熒光增強劑的制備方法為：解離部分：將70～200μmol的PTA、
2～7μmol的氧化釔、0.6g的Triton?X-100和300ml的乙醇混合，用水定容至
1升，用乙酸調(diào)pH值至3.5，制得解離部分；增強部分：將0.1～0.4mmol的
鄰菲羅啉和0.2mol的Tris混合，用水定容至1L，制得增強部分；
所述洗滌液的制備方法為：在濃度為0.01mol/L、pH值為7.4的PBS緩
沖液中加入吐溫-20，混勻，制得吐溫-20質(zhì)量百分比濃度為0.05％的PBS溶
液，然后用質(zhì)量百分比濃度為0.2％的NaN₃溶液防腐處理，制得洗滌液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的時間分辨熒光法綜合檢測子宮癌試劑盒，其特
征在于：所述質(zhì)控品為SCC、CA125、CEA、β-HCG標準品的混合物。