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一種檢測磺胺類化合物的方法及其專用量子點熒光免疫試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-06
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201010244171.0 
  • 技術(專利)名稱 一種檢測磺胺類化合物的方法及其專用量子點熒光免疫試劑盒 
  • 項目單位 中國農業大學
  • 發明人 沈建忠,程林麗,張素霞,王戰輝,史為民,吳聰明,曹興元,湯樹生 
  • 行業類別 智慧健康-其他
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 沈家強
  • 發布時間 2022-01-06  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種檢測磺胺類化合物的方法及其專用量子點熒光免疫試劑盒。本發明提供的檢測磺胺類化合物的量子點熒光免疫試劑盒,包括磺胺類化合物特異性抗體、包被原和標準品溶液;所述包被原為磺胺類化合物半抗原與載體蛋白的偶聯物。本發明的實驗證明,本發明的試劑盒具有樣品前處理過程簡單、操作簡便、費用低廉、特異性高、靈敏度高、精確度高等特點,能夠現場監控且適合大量樣本的篩查。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種檢測磺胺類化合物的量子點熒光免疫試劑盒,包括磺胺類化合物特異性抗
    體、包被原和標準品溶液;所述包被原為磺胺類化合物半抗原與載體蛋白的偶聯物;
    其結構式如式Ⅰ所示:

    所述磺胺類化合物特異性抗體是由保藏號為CGMCC?No.3780的對磺胺二甲嘧
    啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、
    磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪和磺胺對甲氧嘧啶都有交叉反應的磺胺甲基異惡唑單克隆雜
    交瘤細胞株SAs分泌的抗體。
    2.根據權利要求1所述的量子點熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包
    括濃縮洗滌液、濃縮復溶液、包被緩沖液、封閉液和量子點標記的抗抗體;
    所述試劑盒由磺胺類化合物特異性抗體、包被原、標準品溶液、濃縮洗滌液、濃
    縮復溶液、包被緩沖液、封閉液和量子點標記抗抗體組成。
    3.根據權利要求1或2所述的量子點熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述量子
    點標記的抗抗體中所述量子點為QD650。
    4.根據權利要求1或2所述的量子點熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述標準品
    溶液中標準品的濃度為0μg/L、0.5μg/L、1.5μg/L、4.5μg/L、22.5μg/L或112.5μg/L,
    所述標準品為磺胺甲惡唑;
    所述濃縮洗滌液是將0.05g疊氮化鈉和100mL濃度為0.02M、pH為7.4的磷酸鹽
    緩沖液混合得到溶液;
    所述濃縮復溶液是將0.1g牛血清白蛋白和100mL濃度為0.05mol/L、pH為7.4的
    磷酸鹽緩沖液混合得到的溶液;
    所述包被緩沖液是pH值為9.6的濃度為0.03mol/L的碳酸鹽緩沖液;
    所述封閉液是將0.01g疊氮化鈉、10g牛血清白蛋白和100mL濃度為0.03mol/L、
    pH值為7.4磷酸鹽溶液混合得到的溶液。
    5.根據權利要求1或2所述的量子點熒光免疫試劑盒,其特征在于:
    所述包被原是按照如下方法制備得到的:a、將每52mg磺胺類化合物半抗原加
    入6mL0.25M的硫酸水溶液中,得到的溶液稱為A液;將每80mg的載體蛋白溶于
    4mL濃度為100mg/mL、pH值為10的碳酸鈉水溶液中,得到的溶液稱為B液;將每
    20mg亞硝酸鈉溶于2mL水得到的溶液稱為C液;在0℃條件下,將C液加入到A
    液中得到的混合物稱為D液;
    b、將D液逐滴加入到B液中,得到D液和B液的混合液;逐滴加入的方式為從
    開始加入時計起,6min后開始攪拌混合液,并使混合液的pH保持在9-10之間,滴加
    完畢后,繼續攪拌反應4h,將得到的產物透析,得到所述包被原;
    所述磺胺類化合物半抗原的結構式如式Ⅱ所示:

    6.根據權利要求1或2所述的量子點熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述磺胺類
    化合物半抗原為磺胺甲惡唑。
    7.根據權利要求2所述的量子點熒光免疫試劑盒,其特征在于:
    所述量子點標記抗抗體為量子點QD650標記的羊抗鼠抗抗體;
    所述載體蛋白為鼠血清白蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白或血藍蛋白;
    所述磺胺類化合物為磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧
    啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪或磺胺對甲氧嘧啶。
    8.一種檢測磺胺類化合物的方法,包括以下步驟:
    1)樣品前處理:
    將每1g動物組織勻漿后,加入4mL的乙腈-鹽酸混合液振蕩混合1min,以3000g
    的速度離心5min,將2mL上清液用氮氣吹干,加入1mL復溶液溶解干燥的殘留物,
    再加入1mL正己烷混合,3000g離心5min,取下層溶液用復溶液稀釋2倍后獲得待測
    樣本溶液,所述乙腈-鹽酸混合液是由體積比為84:16的乙腈和濃度為0.1M鹽酸水溶
    液混合得到;所述動物組織為豬肉或雞肉;所述復溶液為將所述濃縮復溶液用
    0.05mol/L、pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液稀釋10倍得到的;
    2)利用權利要求1-7中任一所述的檢測磺胺類化合物的量子點熒光免疫試劑盒
    檢測步驟1)中的樣本溶液;
    所述磺胺類化合物為磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧
    啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪或磺胺對甲氧嘧啶。
    9.一種磺胺類化合物特異性抗體,其是由保藏號為CGMCC?No.3780的對磺胺
    二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹
    噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪和磺胺對甲氧嘧啶都有交叉反應的磺胺甲基異惡唑單
    克隆雜交瘤細胞株SAs分泌的抗體。
    10.一種雜交瘤細胞株,其是保藏號為CGMCC?No.3780的對磺胺二甲嘧啶、磺
    胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧
    啶、磺胺甲氧噠嗪和磺胺對甲氧嘧啶都有交叉反應的磺胺甲基異惡唑單克隆雜交瘤細
    胞株SAs。
    展開

專利技術附圖

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