本發(fā)明公開了一種黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫(CLEIA)檢測試劑盒，包括盒體，設在盒體內的化學發(fā)光板和設在盒體內的試劑；其特征在于，所述化學發(fā)光板的各孔包被有抗黃曲霉毒素M1抗體；所述試劑包括：酶標黃曲霉毒素M1抗原濃縮液，酶標黃曲霉毒素M1抗原稀釋液，黃曲霉毒素M1系列標準品溶液，化學發(fā)光底物A、B液，濃縮洗滌液，濃縮復溶液；本發(fā)明的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒具有高靈敏度、簡便快速、準確度高的特點，與傳統(tǒng)的ELISA法比較，操作時間大幅度減少。可用作檢測牛奶、奶粉中黃曲霉毒素M1殘留檢測。

1.一種黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，包括盒體，設在盒體內的化學
發(fā)光板和設在盒體內的試劑；其特征在于：所述化學發(fā)光板的各孔包被有抗黃曲霉毒素M1
抗體；所述試劑包括：酶標黃曲霉毒素M1抗原濃縮液，酶標黃曲霉毒素M1抗原稀釋液，黃曲
霉毒素M1系列標準品溶液，化學發(fā)光底物A、B液，濃縮洗滌液，濃縮復溶液；
所述酶標黃曲霉毒素M1抗原中的黃曲霉毒素M1抗原是由黃曲霉毒素M1半抗原與卵清
蛋白偶聯(lián)得到，所述抗黃曲霉毒素M1抗體是由黃曲霉毒素M1半抗原與牛血清蛋白偶合制成
的偶聯(lián)物作為免疫原免疫Balb/c小鼠制備獲得，所述黃曲霉毒素M1半抗原的合成方法為：
取黃曲霉毒素M1 5mg，加干燥的乙腈10ml溶解，滴加含3mg三溴化硼溶液1ml，室溫攪拌4h，
停止反應，檢測，原料全部反應完成，停止反應，蒸干，加水與適量乙酸乙酯，萃取，靜置，分
層，分去水相，無水硫酸鈉干燥，蒸干，得到產物1；產物1加DMF溶解，加碳酸鈉20mg，攪拌，加
溴丁酸10mg，60℃反應8h，檢測，原料全部反應完成，加水、乙酸乙酯萃取，水洗，干燥蒸干，
過硅膠短柱，得到半抗原產物。
2.根據(jù)權利要求1所述黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于：所
述化學發(fā)光板為乳白色不透明聚苯乙烯96孔化學發(fā)光板。
3.根據(jù)權利要求1所述黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于：所
述抗體包被濃度為5.0μg/mL。
4.根據(jù)權利要求1所述黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于：所
述酶標黃曲霉毒素M1抗原的工作濃度為1:4000。
5.根據(jù)權利要求1所述黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于：所
述黃曲霉毒素M1系列標準品溶液濃度分別為：0、0.05、0.15、0.45、1.35、4.05ng/mL。
6.根據(jù)權利要求1所述黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于：所
述濃縮復溶液具體為濃縮磷酸鹽緩沖液，是每升含NaH₂PO₄·2H₂O 5.74g、Na₂HPO₄·12H₂O
32.6g的水溶液。
7.根據(jù)權利要求1所述黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于：所
述濃縮洗滌溶液是含有體積分數(shù)0.05%吐溫-20的pH＝7.4、0.1mol/L磷酸鹽緩沖液。
8.根據(jù)權利要求1所述黃曲霉毒素M1的化學發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，其特征在于：所
述化學發(fā)光底物A液為魯米諾含量為0.01M、對甲苯酚含量為0.001M pH＝8.8 的三羥甲基
氨基甲烷溶液；B液為每100mL溶液含檸檬酸2.1g、無水Na₂HPO₄ 2.82g、0.75%的過氧化氫脲
0.64mL的水溶液，所述百分比為質量百分比。