本發明公開了一種檢測狂犬病毒的熒光定量PCR試劑盒及應用，該試劑盒含有：a)RNA抽提液、b)逆轉錄酶反應液、c)逆轉錄酶、d)RNA酶抑制劑、e)引物和TaqMan探針、f)標準陽性DNA模板、g)PCR熒光定量反應液，其特征是：引物序列分別為正義引物：5′-TAGGATGCTATATGGGTCAAGTCAGA-3′，反義引物：5′-TTCAAATGTCCCTTTCCCGAAGAA-3′，擴增子大小為125bp，熒光探針序列為：5′-FAM-CAACGGTTATTGCTGCATGTGCTCCTCA-TAMRA-3′，探針的5’端標記熒光發射基團FAM，3’端標記熒光淬滅基團TAMRA，標準陽性DNA模板由已插入狂犬病毒N蛋白區391bp片段的pGEM-T載體轉化大腸桿菌DH5α，增殖后提取質粒，并于紫外分光光度計測A定量并10倍梯度稀釋。高效方便地對血清制品中的狂犬病毒的污染進行實時監控，還能為相關基礎研究提供技術支持，應用前景十分廣泛。

1.一種檢測狂犬病毒的熒光定量PCR試劑盒，該試劑盒含有：a)RNA抽提液、b)逆轉錄酶反應液、c)逆轉錄酶、d)RNA酶抑制劑、e)引物和TaqMan探針、f)標準陽性DNA模板、g)熒光定量PCR反應液，其特征在于：引物序列分別為正義引物：5′-TAGGATGCTATATGGGTCAAGTCAGA-3′，反義引物：5′-TTCAAATGTCCCTTTCCCGAAGAA-3′，擴增子大小為125bp，熒光探針序列為：5′-FAM-CAACGGTTATTGCTGCATGTGCTCCTCA-3′，探針的5’端標記熒光發射基團FAM，3’端標記熒光淬滅基團TAMRA，標準陽性DNA模板由已插入狂犬病毒N蛋白區391bp片段的pGEM-T載體轉化大腸桿菌DH5α，增殖后提取質粒，并于紫外分光光度計測A₂₆₀定量并10倍梯度稀釋。2.根據權利要求1所述的一種檢測狂犬病毒的熒光定量PCR試劑盒，其特征是：所述的逆轉錄反應液是由5×buffer，10μmol/L的反義引物、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、10mM?dNTPs和無RNA酶的滅菌雙蒸水組成。3.根據權利要求1所述的一種檢測狂犬病毒的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于：所述的熒光定量PCR反應液是由2×Premix、10μmol/L的正義引物和反義引物、10μmol/L熒光探針和無菌雙蒸水組成。4.根據權利要求1所述的一種檢測狂犬病毒的熒光定量PCR試劑盒，其特征是：所述的標準陽性模板DNA核苷酸序列為：TAGGATGCTATATGGGTCAAGTCAGATCCCTAAATGCAACGGTTATTGCTGCATGTGCTCCTCATGAAATGTCTGTTCTAGGGGGCTATCTGGGAGAGGAATTCTTCGGGAAAGGGACATTTGAA。