1.一種高特異性的人17號染色體著絲粒探針試劑盒,其特征在于,包括:熒光材料標記
的CEP17著絲粒探針和雜交緩沖液,所述CEP17著絲粒探針的序列號如SEQ ID NO.1所示;所
述雜交緩沖液為10wt%硫酸葡聚糖、0.01M的PBS緩沖液和去離子甲酰胺按照體積比為1:6:3
的比例混合的混合液。
2.根據權利要求1所述的高特異性的人17號染色體著絲粒探針試劑盒,其特征在于,所
述熒光材料為異硫氰酸熒光素。
3.根據權利要求1所述的高特異性的人17號染色體著絲粒探針試劑盒,其特征在于,所
述熒光材料標記的標記效率為1%~5%。
4.權利要求1~3任一所述高特異性的人17號染色體著絲粒探針試劑盒的制備方法,其
特征在于,包括如下步驟:
(1)制備高特異性的人17號染色體著絲粒探針:
a.查找并篩選人17號染色體著絲粒的高特異性區域,人工合成該區域序列,獲得pUc-
CEP17質粒;
b.根據步驟a所得pUc-CEP17質粒的序列設計引物;
c.以步驟a所得pUc-CEP17質粒為模板,加入已用熒光材料標記的dUTP,利用步驟b設計
的引物進行PCR擴增,得到熒光材料標記的PCR產物,所述PCR產物經純化后即為CEP17著絲
粒探針;
(2)將步驟(1)所得CEP17著絲粒探針用雜交緩沖液稀釋至終濃度為2ng/μL,然后分裝、
貼標簽、組裝后即得到高特異性的人17號染色體著絲粒探針試劑盒。
5.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)中所述引物為:
F:GGAATCTGCAAGTGGATATG;R:CAGAACTACTCTATGAAAAGC。
6.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)中所述PCR擴增的反應體系
為:5 μL,10X buffer;2 μL,10 μM F/R引物;1 μL,1 ng/μL pUc-CEP17質粒;1 μL,10 mM
dATP;1 μL,10 mM dCTP;1 μL,10 mM dGTP;0.75 μL,10 mM dTTP;2.5 μL,1 mM
Fluorescein-12-dUTP;0.5 μL,TaqDNA polymerase;35.25μL去離子水。
7.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)中所述PCR擴增的程序為:94
℃ 5min;55℃ 5min;72℃ 1min,94℃ 1min,55℃ 1min,30cycles;72℃ 5min,4 ℃ 保存。
8.權利要求1~3任一所述高特異性的人17號染色體著絲粒探針試劑盒在制備用于檢測
人17號染色體著絲粒產品中的應用。
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