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T-2毒素的檢測方法及檢測試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-08-19
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610041769.7 
  • 技術(專利)名稱 T-2毒素的檢測方法及檢測試劑盒 
  • 項目單位 湖南科技大學
  • 發明人 夏曉東,冉海寧,楊陽,唐春然 
  • 行業類別 醫藥制造-包裝材料
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 朱嶠芹
  • 發布時間 2021-08-19  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種檢測T?2毒素的方法及試劑盒,該方法包括如下步驟:(A)使T?2毒素核酸適體與單鏈信號探針ssDNA雜交,形成雜交鏈;(B)使該雜交鏈與待測樣品接觸,當待測樣品中有T?2毒素存在時,雜交鏈與T?2毒素反應釋放出單鏈信號探針ssDNA;(C)利用DNA擴增,使雜交鏈成雙鏈DNA,然后用外切酶,將雙鏈DNA水解成單核苷酸而清除雙鏈DNA,此時體系中留下ssDNA;(D)在ssDNA誘導下,銀離子還原生成近紅外熒光銀納米簇;檢測體系熒光強度,從而測定待測樣品中的T?2毒素的含量。該方法具有高靈敏度,操作簡單,低成本等特點。
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  • 02

    說明書

    1.一種T-2毒素的檢測方法,其特征是,該方法包括如下步驟:
    (A)T-2毒素核酸適體與單鏈信號探針DNA(ssDNA)雜交,形成雜交鏈;
    (B)使該雜交鏈與待測樣品作用,當待測樣品中有T-2毒素存在時,雜交鏈選擇性地與
    T-2毒素反應釋放出單鏈信號探針ssDNA;
    (C)消除雜交鏈的干擾,利用DNA擴增,使雜交鏈成雙鏈DNA,然后用外切酶,將雙鏈DNA
    水解成單核苷酸而除去雙鏈DNA,留下單鏈信號探針ssDNA;
    (D)利用T-2毒素核酸適體-T-2毒素結合體不能誘導銀離子還原生成近紅外熒光銀納
    米簇,只有單鏈信號探針ssDNA能夠誘導銀離子還原成近紅外熒光銀納米簇,檢測體系的熒
    光強度,從而測定待測樣品中的T-2毒素的含量;
    所述T-2毒素核酸適體為5’-CAGCTCAGAAGCTTGATCCTGTATATCAAGCATCGCGTGTTTACACATG
    CGAGAGGTGAAGACTCGC-3’;所述的單鏈信號探針ssDNA為5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCCGCGAG
    TCTTCACC-3’。
    2.一種檢測T-2毒素的試劑盒,其特征是,其至少包括: T-2毒素核酸適體、可與T-2毒
    素核酸適體雜交的單鏈信號探針ssDNA、DNA擴增體系、核酸外切酶、銀離子還原檢測體系。
    3.根據權利要求2所述的試劑盒,其特征是,所述T-2毒素核酸適體為5’-
    CAGCTCAGAAGCTTGATCCTGTATATCAAGCATCGCGTGTTTACACATGCGAGAGGTGAAGACTCGC-3’。
    4.根據權利要求2所述的試劑盒,其特征是,所述的單鏈信號探針DNA為5’-
    CCCCCCACACCCGATCCCCCCCGCGAGTCTTCACC-3’。
    5.根據權利要求2中所述的檢測T-2毒素的試劑盒,其特征是,所述DNA擴增體系包括緩
    沖溶液、dNTP和Phi29 DNA 聚合酶;所述緩沖溶液由Tris-HCl、MgCl2、 (NH4)2SO4組成。
    6.根據權利要求2中所述的檢測T-2毒素的試劑盒,其特征是,所述核酸外切酶為Exo
    III核酸外切酶。
    7.根據權利要求2中所述的檢測T-2毒素的試劑盒,其特征是,所述的銀離子還原檢測
    體系中還原劑為硼氫化物。
    8.根據權利要求7中所述的檢測T-2毒素的試劑盒,其特征是,所述硼氫化物為硼氫化
    鈉。
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專利技術附圖

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