本發明涉及生物技術領域，提供一種山羊偽結核桿菌抗體的ELISA檢測試劑盒的制備方法。本發明以完整的偽結核棒狀桿菌菌體作為包被抗原，建立間接ELISA檢測方法，檢測血清中是否含有抗偽結核棒狀桿菌抗體，判斷山羊是否感染偽結核。本發明確定了陰陽性臨界值，具有很高的特異性和重復性，能夠快速有效的檢測出山羊血清中的偽結核抗體，可用于山羊偽結核診斷、流行病學調查。

1.一種山羊偽結核桿菌抗體的ELISA檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：所述的制備
方法為：用偽結核棒狀桿菌菌體作為包被抗原，確定抗原包被濃度，待檢血清稀釋度，并界
定陰陽血清的臨界值，建立并組裝間接ELISA檢測試劑盒；
包被抗原的制備：將偽結核棒狀桿菌單菌落接種于5mL LB培養液中，在200～220rpm，
37℃的條件下擴大培養48h后，10000～12000rpm離心3～5min，收集菌體，用PBS洗滌菌體三
次，用碳酸鹽緩沖液重懸菌體，制成菌懸液，此即為包被抗原；
配制不同濃度的包被抗原，確定包被抗原濃度對應的OD₆₀₀值在0.060～0.090之間。