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一種芝麻抗裂蒴性檢測引物、檢測試劑盒及檢測方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-05
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710551627.X 
  • 技術(專利)名稱 一種芝麻抗裂蒴性檢測引物、檢測試劑盒及檢測方法 
  • 項目單位 河南省農業科學院芝麻研究中心
  • 發明人 劉艷陽,鄭永戰,梅鴻獻,武軻,杜振偉,崔承齊,李小娟,江曉琳 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 馮亮志
  • 發布時間 2022-02-05  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種芝麻抗裂蒴性檢測引物、檢測試劑盒及檢測方法,屬于分子生物學技術領域。抗裂蒴芝麻KANADI基因與裂蒴芝麻基因的序列相比,DNA序列缺失14個堿基,cDNA序列缺失了77個堿基,缺失堿基位于轉錄起始密碼子下游第1,118bp與1,132bp之間,14bp堿基位于第2個外顯子和第2個內含子連接處。本發明根據該基因序列差別特點設計抗裂蒴性檢測引物,為芝麻分子標記輔助選擇育種提供了重要檢測引物,為篩選抗裂蒴的芝麻新品種提供了快速、準確的檢測方法。
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  • 02

    說明書

    1.一種芝麻抗裂蒴性檢測引物,其特征在于:包括正向引物和反向引物,所述正向引物序列為5'-ACTCTTGCTCATGTCAAGAGCCATT-3',所述反向引物序列為5'-TGGGCTTCTTTCCTTTGACTAC-3'。2.包含如權利要求1所述的檢測引物的檢測試劑盒。3.采用如權利要求1所述的芝麻抗裂蒴性檢測引物的檢測方法,其特征在于:包括:提取待測樣本的DNA為模板,加入正向引物及反向引物進行PCR擴增,將擴增產物電泳分離或測序,判定結果;所述正向引物序列為5'-ACTCTTGCTCATGTCAAGAGCCATT-3',所述反向引物序列為5'-TGGGCTTCTTTCCTTTGACTAC-3';結果的判定方法為:若擴增產物僅一條89bp的條帶,則樣本為抗裂蒴性純合材料;若擴增產物僅一條103bp的條帶,則樣本為裂蒴性純合材料;若擴增產物為89bp和103bp兩條條帶,則為裂蒴性雜合材料。4.根據權利要求3所述的檢測方法,其特征在于:所述PCR擴增的體系為10μL,包含25-50ng的模板DNA,0.5U的Taq酶,1μL的10×PCR buffer,0.2μL的10mM/μL dNTPs,0.2μL的10μM/μL正向引物,0.2μL的10μM/μL反向引物,余量為水。5.根據權利要求3或4所述的檢測方法,其特征在于:所述PCR擴增的程序為:預變性94℃ 1min;變性94℃ 30s,退火57℃ 30s,延伸72℃ 30s,35個循環,延伸72℃ 10min。6.根據權利要求5所述的檢測方法,其特征在于:所述電泳分離為采用9%的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離。7.根據權利要求3所述的檢測方法,其特征在于:所述待測樣本為鄭芝InD01與其他材料獲得的F2代以上群體的后代單株。8.根據權利要求3所述的檢測方法,其特征在于:采用CTAB法提取待測樣本的DNA。
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專利技術附圖

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