本發(fā)明提供利用分子標(biāo)記方法對(duì)紅鰭東方純親子關(guān)系進(jìn)行鑒定的方法及其微衛(wèi)星引物與試劑盒，所選擇的44對(duì)微衛(wèi)星引物在紅鰭東方純PCR擴(kuò)增反應(yīng)穩(wěn)定、擴(kuò)增片段清楚、多態(tài)性高。運(yùn)用本技術(shù)，可將混雜的不同家系的紅鰭東方純個(gè)體區(qū)分開來，有助于快速、準(zhǔn)確鑒別不同家系的紅鰭東方純，對(duì)紅鰭東方純保種、繁殖配組和選擇育種具有極大的應(yīng)用價(jià)值。

1.一種鑒定紅鰭東方鲀親子關(guān)系的微衛(wèi)星引物組，其特征在于，所述引物針
對(duì)紅鰭東方鲀基因組的不同連鎖群；所述引物選自如下引物對(duì)中的3-10對(duì)：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微衛(wèi)星引物組，其特征在于，所述引物組由如下引
物對(duì)組成：


3.一種鑒定紅鰭東方鲀親子關(guān)系的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1
至2中任一項(xiàng)所述的鑒定紅鰭東方鲀親子關(guān)系的微衛(wèi)星引物組。
4.一種鑒定紅鰭東方鲀親子關(guān)系的分子標(biāo)記方法其特征在于采用以下步驟：
(1)選擇下述44對(duì)特異微衛(wèi)星引物進(jìn)行PCR反應(yīng)；


(2)采集不同家系親本和子代個(gè)體的鰭條，提取基因組DNA；
(3)用步驟(2)的基因組DNA為模板，步驟(1)所選擇的44對(duì)微衛(wèi)星
引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；
(4)對(duì)步驟(3)的PCR產(chǎn)物用擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)8％非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
檢測(cè)，硝酸銀染色、顯色后，凝膠在HPscanjetG4010掃描儀成像；
(5)將PCR的電泳檢測(cè)結(jié)果數(shù)字化處理，用遺傳分析軟件進(jìn)行分析；
(6)獲得每個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的排除率，統(tǒng)計(jì)3-10個(gè)標(biāo)記的累積排除率；利用
排除率前5位的標(biāo)記組合使用，完成家系子代與親本的親子關(guān)系鑒定；
(7)利用親本與子代的親子關(guān)系，就能將不同紅鰭東方鲀家系區(qū)分開來。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，在進(jìn)行PCR擴(kuò)
增時(shí)，PCR反應(yīng)總體積為25μL，包括：10×Buffer2.5μL，25mmol/L的
Mg²⁺1μL，各2mmol/L的dNTPs1μL，10μmol/L的正、反向引物各1
μL，50ng/μL的模版DNA1μL，TaqDNA聚合酶1U，加適量ddH₂O。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，PCR反應(yīng)程序
為：94℃預(yù)變性3min，94℃變性30s，退火30s--72℃延伸30s進(jìn)行30個(gè)循
環(huán)，最后72℃延伸10min。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(5)中，使用的遺傳分
析軟件為Gel-ProAnalyzer4.5凝膠分析軟件和CERVUSVersion3.0。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(6)中，用遺傳分析軟
件對(duì)電泳譜帶進(jìn)行數(shù)字化處理，計(jì)算每個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的排除率；按照排除率
高低，挑選排序前10位的微衛(wèi)星標(biāo)記，3-10個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的累積排除率范
圍為95.79％-99.99％；利用5個(gè)排除率排序在前的微衛(wèi)星標(biāo)記完成了家系親
本與子代的親子關(guān)系鑒定。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(6)中，排除率前5位
的微衛(wèi)星標(biāo)記名稱和序列信息如下：