本發(fā)明公開一種金黃色葡萄球菌的檢測方法及檢測試劑盒。以金黃色葡萄球菌特異性的核酸適體為分子識別元件，在金黃色葡萄球菌作用下打開莖環(huán)結(jié)構(gòu)DNA，進一步與膠體金納米顆粒上的核酸相互作用，形成部分雙鏈DNA，在核酸內(nèi)切酶的作用下切割膠體金上的核酸序列，使熒光標記的一端掉落遠離膠體金，從而使淬滅的熒光恢復，達到檢測效果。由于工具酶的作用，可不斷放大檢測信號，檢測方法具有較高的靈敏度，其檢測限位5 cfu/mL。該檢測方法具有很好的特異性，常見的其他菌對檢測不產(chǎn)生影響。整個檢測過程可在室溫下完成反應(yīng)，具有操作簡單、經(jīng)濟便宜等優(yōu)點，無需對菌進行裂解，可直接檢測活菌。

1.一種金黃色葡萄球菌的檢測試劑盒，其特征在于，包括雜交緩沖液、識別雙鏈切割單鏈的核酸內(nèi)切酶、猝滅熒光的納米顆粒和下列核酸序列：核酸序列H1：依次具有A、B、C區(qū)域，其中A區(qū)域為金黃色葡萄球菌的核酸適體，C與A部分互補形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)的莖部分，A與C不互補的序列凸起于莖環(huán)結(jié)構(gòu)外側(cè)，B構(gòu)成莖環(huán)結(jié)構(gòu)的環(huán)部分，B中包含一段與H2的核酸內(nèi)切酶識別位點互補配對的核酸序列；核酸序列H2：具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)，H2的一端修飾基團，固定在能猝滅熒光的納米顆粒上，另一端修飾相應(yīng)的熒光基團；H2的環(huán)結(jié)構(gòu)上包含有一段核酸內(nèi)切酶的識別位點序列，與H1的B區(qū)域的相應(yīng)序列互補。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：H1的A區(qū)域的核酸序列為5'-GCGCCCTCTCACGTGGCACTCAGAGTGCCGGAAGTTCTGCGTTAT-3'。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：核酸內(nèi)切酶選自Nt.BbvCI、Bmtl、BseYI 、BstUI 。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：當核酸內(nèi)切酶為Nt.BbvCI時，H2的環(huán)結(jié)構(gòu)上包含有一段5'-CCTCAGC-3'的核酸內(nèi)切酶識別位點序列，H1的B區(qū)域中包含一段與之互補的5'-GCTGAGG-3'序列。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：當核酸內(nèi)切酶為Bmtl時，H2的環(huán)結(jié)構(gòu)上包含有一段5'-GCTAGC-3'核酸內(nèi)切酶識別位點序列，H1的B區(qū)域中包含一段與之互補的5'-GCTAGC-3'序列。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：能猝滅熒光的納米顆粒包括金納米顆粒、石墨烯納米顆粒、碳納米管、銀納米顆粒，所述作為固定材料的納米顆粒直接與H2的修飾基團結(jié)合，或是通過納米顆粒上修飾對應(yīng)的基團與H2的修飾基團結(jié)合。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測試劑盒，其特征在于：H2的一端修飾巰基，固定在金納米顆粒上；或H2的一端修飾羥基，固定在修飾了羧基的納米顆粒上；或H2的一端修飾了生物素，固定在修飾了SA的納米顆粒上。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：熒光基團為FAM、Cy3、Cy5。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：所述檢測試劑盒包括核酸內(nèi)切酶Nt.BbvCI和下列核酸序列：核酸序列H1:5'-GCGCCCTCTCACGTGGCACTCAGAGTGCCGGAAGTTCTGCGTTAT-GTGCTGAGGAT-ATAACGCA-3'；核酸序列H2: 5'-GCTACGTGATCCTCAGCACACCGTAGC-3'。10.一種金黃色葡萄球菌的檢測方法，所述檢測方法不用于診斷目的，其特征在于，包括下列步驟：（1）先用雜交緩沖液分別溶解核酸H1和H2，1μM的H2固定在納米顆粒表面；（2）在500 nM的H1中加入待測溶液，充分混勻，室溫反應(yīng)30分鐘；然后加入到步驟（1）中的H2溶液中，充分混勻，室溫反應(yīng)30分鐘；（3）加入25 U的識別雙鏈切割單鏈的核酸內(nèi)切酶，充分混勻，室溫反應(yīng)90分鐘；12000rpm離心后保留上清，用于熒光檢測，激發(fā)峰為495 nm，發(fā)射峰為525 nm；根據(jù)熒光發(fā)射光強度與金黃色葡萄球菌濃度呈正相關(guān)來判斷結(jié)果；其中，雜交緩沖液、識別雙鏈切割單鏈的核酸內(nèi)切酶和核酸序列H1和H2如權(quán)利要求1～9任一項所述。