本發明提供了一種用于快速高效地從外周血中提取非血緣性有核細胞的組合物和試劑盒。本發明的用于從血液中快速獲取循環的非血緣性有核稀有細胞的組合物，包括下述成份：緩沖液，低滲紅細胞融破液，包被了抗血緣性有核細胞表面標識物抗體的磁性或非磁性免疫微球，以及一定密度的細胞分離介質。相對于目前市場上通用的商品化離心介質而言，本發明的新的組合物的使用可極大地縮短離心時間，并將細胞回收率從原有的60±20％穩定地提高到95％以上。該組合物與去除白細胞試劑和低滲融破紅細胞手段相結合，可以有效地快速富集提取外周血中的非血緣性循環稀有細胞，如腫瘤上皮細胞及血管內皮細胞等，對腫瘤及心臟病的早期診斷具有極大的現實臨床意義。

1.一種用于從血液中快速獲取循環的非血緣性有核稀有細胞的
組合物，包括下述成份：緩沖液，低滲紅細胞融破液，包被了
抗血緣性有核細胞表面標識物抗體的磁性或非磁性免疫微球
或免疫顆粒，以及細胞分離介質，其中，所述緩沖液的滲透壓
介于280～320mOsm/kg?H₂O、pH為6.8～7.8，所述細胞分離
介質在20℃下的比重為1.07260～1.07650克/毫升，所述免
疫微球或免疫顆粒的比重高于所述細胞分離介質的比重，并且
所述細胞分離介質包含選自下列試劑中的任意一種或任意兩
種或兩種以上的成份：聚乙烯吡咯烷酮包被的膠質二氧化硅，
多聚糖和泛影酸鈉或其衍生物甲泛影酰胺，右旋糖苷，蔗糖，
由蔗糖和表氯醇聚合而成的非離子聚合物。
2.根據權利要求1所述的組合物，其中，所述免疫微球或免疫顆
粒共價或非共價結合有特異性地識別下述的白細胞表面標示
物的一種或多種的抗體：CD3、CD31、CD34、CD45、CD50、
CD69、CD84或CD102。
3.根據權利要求1或2所述的組合物，其中，所述循環的非血緣
性有核稀有細胞選自：循環的具有上皮來源的任何實體瘤細胞
或不具有上皮來源的任何腫瘤細胞，循環的血管內皮細胞，干
細胞，以及免疫細胞。
4.根據權利要求3所述的組合物，其中，所述循環的非血緣性有
核稀有細胞選自腫瘤干細胞。
5.根據權利要求1或2所述的組合物，其中，所述緩沖液的滲透
壓介于280～320mOsm/kg?H₂O、PH為6.85～7.75。
6.根據權利要求3所述的組合物，其中，所述循環的非血緣性有
核稀有細胞在所采集的所述血液樣本中的比例占所有有核細
胞的0.1％以下，所述循環的非血緣性有核稀有細胞選自所有
具有上皮來源的實體瘤細胞，或不具有上皮來源的任何腫瘤細
胞，循環的血管內皮細胞，血中胎兒細胞，干細胞，以及免疫
細胞。
7.根據權利要求6所述的組合物，其中，所述循環的非血緣性有
核稀有細胞在所采集的所述血液樣本中的比例占所有有核細
胞的0.1％以下，所述循環的非血緣性有核稀有細胞選自腫瘤
干細胞。
8.根據權利要求6所述的組合物，其中，所述具有上皮來源的實
體瘤細胞選自以下細胞：肺癌、宮頸癌、食管癌、結直腸癌、
乳腺癌、胃癌、肝癌的細胞；所述不具有上皮來源的任何腫瘤
細胞為黑色素瘤細胞。
9.一種用于從血液中快速獲取循環的非血緣性有核稀有細胞的
試劑盒，包括：
一種組合物，所述組合物包括下述成份：緩沖液，低滲
紅細胞融破液，包被了抗血緣性有核細胞表面標識物抗體的磁
性或非磁性免疫微球或免疫顆粒，以及細胞分離介質；其中，
所述緩沖液的滲透壓介于280～320mOsm/kg?H₂O、pH為
6.8～7.8，所述細胞分離介質在20℃下的比重為1.07260～
1.07650克/毫升，所述免疫微球或免疫顆粒的比重高于所述細
胞分離介質的比重，并且所述細胞分離介質包含選自下列試劑
中的任意一種或任意兩種或兩種以上的成份：聚乙烯吡咯烷酮
包被的膠質二氧化硅，多聚糖和泛影酸鈉或其衍生物甲泛影酰
胺，右旋糖苷，蔗糖，由蔗糖和表氯醇聚合而成的非離子聚合
物；
容納所述組合物的容器以及可選擇地帶有抗凝劑的采血
管；載玻片以及
所述試劑盒的使用說明書。
10.根據權利要求9所述的試劑盒，其中，所述免疫微球或免疫顆
粒共價或非共價結合有特異性地識別下述的白細胞表面標示
物的一種或多種的抗體：CD3、CD31、CD34、CD45、CD50、
CD69、CD84或CD102。
11.根據權利要求9或10所述的試劑盒，其中，所述循環的非血
緣性有核稀有細胞選自：循環的具有上皮來源的任何實體瘤細
胞或不具有上皮來源的任何腫瘤細胞，循環的血管內皮細胞，
血中胎兒細胞，干細胞，以及免疫細胞。
12.根據權利要求11所述的試劑盒，其中，所述循環的非血緣性
有核稀有細胞選自腫瘤干細胞。
13.根據權利要求9或10所述的試劑盒，其中，所述循環的非血
緣性有核稀有細胞在所采集的所述血液樣本中的比例占所有
有核細胞的0.1％以下，所述循環的非血緣性有核稀有細胞選
自所有具有上皮來源的實體瘤細胞，或不具有上皮來源的實體
瘤細胞，循環的血管內皮細胞，血中胎兒細胞，干細胞，以及
免疫細胞。
14.根據權利要求13所述的試劑盒，其中，所述循環的非血緣性
有核稀有細胞在所采集的所述血液樣本中的比例占所有有核
細胞的0.1％以下，所述循環的非血緣性有核稀有細胞選自腫
瘤干細胞。
15.根據權利要求13所述的試劑盒，其中，所述具有上皮來源的
實體瘤細胞選自以下細胞：肺癌、宮頸癌、食管癌、結直腸癌、
乳腺癌、胃癌、肝癌的細胞；所述不具有上皮來源的任何腫瘤
細胞為黑色素瘤細胞。
16.根據權利要求1～8任一項所述的組合物或根據權利要求9～
15任一項所述的試劑盒在生物醫學實驗中的應用。