本發(fā)明涉及一種基于氧化酶催化的氧化還原反應(yīng)來檢測(cè)溶解氧的試紙及試劑盒，包括與氧氣反應(yīng)生成過氧化氫的氧化酶及相應(yīng)酶底物，以及與過氧化氫反應(yīng)生成有顏色或帶熒光的化合物的顯色劑，其中，氧化酶及相應(yīng)酶底物、顯色劑可負(fù)載在載體上，制備成試紙。通過選擇和設(shè)計(jì)穩(wěn)定性好的氧化酶來催化相應(yīng)酶底物與溶解氧反應(yīng)，消耗氧分子，形成活性分子過氧化氫；所生成的過氧化氫將顯色劑氧化成帶顏色或熒光的產(chǎn)物，根據(jù)產(chǎn)物的顏色深淺或熒光的強(qiáng)弱來檢測(cè)待測(cè)液中溶解氧的濃度。該試紙、試劑盒及方法可用于測(cè)定水介質(zhì)中的溶解氧含量，可應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域，操作簡(jiǎn)單，制作成本低，易于推廣。

1.一種用于溶解氧測(cè)定的試劑盒，其特征在于：包括與氧氣反應(yīng)生成過氧化氫的氧化酶及相應(yīng)酶底物，以及與過氧化氫反應(yīng)生成有顏色或帶熒光的化合物的顯色劑；所述試劑盒還包括帶瓶蓋的測(cè)試瓶，所述測(cè)試瓶?jī)?nèi)置有所述氧化酶及相應(yīng)酶底物、顯色劑；其中，所述氧化酶及相應(yīng)酶底物，顯色劑負(fù)載在載體上，制備成試紙；所述載體為濾紙；所述試紙由以下方法制備得到：將氧化酶加入水中至全部溶解，得到溶液一；將酶底物、顯色劑加入水中至全部溶解，得到溶液二；向?yàn)V紙上滴加溶液一，室溫晾干，得到試紙一；另取濾紙，滴加溶液二，30℃～45℃下至濾紙烘干，得到試紙二；烘干時(shí)間小于12小時(shí)；所述測(cè)試瓶?jī)?nèi)所述氧化酶的濃度不小于1U/mL；所述載體上還負(fù)載有催化劑和緩沖液，所述催化劑為辣根過氧化物酶或鐵基化合物，所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液、醋酸-醋酸鹽緩沖液、PBS緩沖液或Tris-HCl緩沖液；所述顯色劑為4,4'-二氨基聯(lián)苯、3,5,3',5'-四甲基-4,4'-二氨基聯(lián)苯、3,4,3',4'-四氨基聯(lián)苯、3',3'-二甲基-4,4'-二氨基聯(lián)苯；或，所述的顯色劑為由4-氨基安替比林與苯酚、苯胺、羧基苯酚或羧基苯胺組成試劑對(duì)。2.如權(quán)利要求1所述的用于溶解氧測(cè)定的試劑盒，其特征在于：所述氧化酶及相應(yīng)酶底物選自以下組中的一種或多種：葡萄糖氧化酶及葡萄糖、乳酸氧化酶及乳酸、L-氨基酸氧化酶及L-氨基酸、D-氨基酸氧化酶及D-氨基酸、L-α-羥基酸氧化酶及L-α-羥基酸、尿酸氧化酶及尿酸、醇類氧化酶及醇、醛類氧化酶及醛。3.如權(quán)利要求2所述的用于溶解氧測(cè)定的試劑盒，其特征在于：所述醇類氧化酶及醇選自以下組中的一種或多種：膽固醇氧化酶及膽固醇、乙醇氧化酶及乙醇；所述醛類氧化酶及醛選自以下組中的一種或多種：乙二醛氧化酶及乙二醛、視黃醛氧化酶及視黃醛、牛醛氧化酶及牛醛。4.如權(quán)利要求1所述的用于溶解氧測(cè)定的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括用于溶解氧測(cè)定的比色卡，所述比色卡通過如下步驟制備：(1)向盛有水的容器中分別通入不同氧氣濃度的氣體，持續(xù)通入氣體直至水中溶解氧濃度測(cè)量值穩(wěn)定；(2)取步驟(1)水樣分別加入相同體積溶解氧測(cè)試瓶中，水樣加滿測(cè)試瓶，測(cè)試瓶中無氣泡，蓋緊瓶蓋，搖晃后靜置2-5min，觀察顏色變化；所述測(cè)試瓶?jī)?nèi)置有所述的試紙；(3)記錄不同溶解氧濃度的水樣顏色制作成溶解氧比色卡。