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通過離體挽救培養獲得草莓遠緣雜種的方法及培養基

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-05
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201410175221.2 
  • 技術(專利)名稱 通過離體挽救培養獲得草莓遠緣雜種的方法及培養基 
  • 項目單位 上海市農業科學院
  • 發明人 高清華,殷麗青,段可,葉正文,鄭宏清,張麗勍 
  • 行業類別 中藥材獲取-植物藥材種植
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 朱悅嬌
  • 發布時間 2022-01-05  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種通過離體挽救培養獲得草莓遠緣雜種的方法及培養基,該技術分別以栽培草莓品種久香、甜查理、豐香為母本或父本,野生黃毛草莓為父本或母本進行雜交,正交與反交同時進行。通過對雜交授粉后的未成熟胚進行離體培養,在胚敗育前將其取出進行挽救培養,避免遠緣雜種胚的衰亡,使大量遠緣雜種胚繼續發育成幼苗,并進入選育程序,縮短了育種周期;同時,獲得了大量遠緣雜交后代,實現了草莓屬種間的遠緣雜交,創制了一批新種質,有效地縮短了草莓雜交后代的培育周期,雜種胚成苗率可達到91.67%。
    展開
  • 02

    說明書

    1.通過離體挽救培養獲得草莓遠緣雜種的方法,包括以下步驟:
    1)雜交授粉:以栽培草莓品種和野生草莓品種為雜交親本進行雜交授粉;
    2)果實消毒:將授粉后5~35天其種子未完全發育的果實取下,于4℃~7℃存放3~4小
    時,取大小為1~3厘米的果實,先用70%的酒精表面消毒10~30秒,再用0.1wt%的升汞溶
    液滅菌1~3分鐘,之后用無菌水清洗3~5遍,吸干果實表面水分;
    3)未成熟胚剝離:在無菌條件下,將滅菌的果實取下種子剝離其幼胚,立即接種于誘導
    培養基中離體培養,先暗培養7天,再進行光照培養,誘導培養21~28天后獲得膨大的胚;
    光照培養條件為:光照時間10小時/天,光照強度2000~3000Lx,培養溫度24±1℃;
    誘導培養基:1/2MS基本培養基,蔗糖30~50g/L,瓊脂6~8g/L,吲哚丁酸IBA0.3~
    0.5mg/L,pH5.5~5.8;
    4)胚萌發培養:將膨大的胚剝除胚乳后置于胚萌發培養基中進行挽救培養,培養30~
    35天后幼胚萌發,光照培養條件同步驟3);
    胚萌發培養基:1/2MS基本培養基,蔗糖30~50g/L,瓊脂6~8g/L,萘乙酸NAA0.2~
    0.5mg/L,6-芐氨基腺嘌呤6-BA1.2~1.5mg/L,pH5.5~5.8;
    5)增殖培養:將萌發的幼胚接種至增殖培養基中,光照培養條件和培養基組成與步驟
    4)相同,每10~15天繼代增殖1次,獲得芽苗;
    6)生根培養:將經過1~4次繼代增殖培養的芽苗從芽叢中切下,轉到生根培養基中促
    使其生根,生根培養45~60天,得到生根的草莓胚苗,培養溫度24±1℃;
    生根培養基:1/2MS基本培養基,蔗糖30~50g/L,瓊脂6~8g/L,吲哚丁酸IBA0.2~
    0.5mg/L,6-芐氨基腺嘌呤6-BA0.02~0.05mg/L,水解酪蛋白LH0.2~0.4g/L,腺嘌呤Ad4~
    6mg/L,pH5.5~5.8;
    7)煉苗移栽:開瓶后在瓶底加水,煉苗3~4天,然后將生根苗從培養瓶中取出,清水洗
    凈根系附帶的培養基,然后移栽在栽培基質中遮光處理2~3天,在溫室中保持相對濕度
    75%~85%進行煉苗,培養20~30天即可移入大田種植。
    2.根據權利要求1所述的通過離體挽救培養獲得草莓遠緣雜種的方法,其特征在于,步
    驟7)所述的煉苗移栽過程為:將生根后的草莓胚苗,移栽前將瓶蓋打開一條縫,注入10~15
    毫升無菌水進行自然馴化2~3天,接著完全揭開瓶蓋并添加10~15毫升蒸餾水鍛煉1天,將
    生根苗從培養瓶中取出,清水洗凈根系附帶的培養基,然后移栽在滅菌的栽培基質中遮光
    遮蔭處理2~3天,在溫室中保持相對濕度75%~85%進行煉苗,培養20~30天即可移入大
    田種植。
    3.根據權利要求1或2所述的通過離體挽救培養獲得草莓遠緣雜種的方法,其特征在
    于,所述的栽培草莓品種為久香、甜查理或豐香,野生草莓品種為野生黃毛草莓。
    4.用于離體挽救培養獲得草莓遠緣雜種的培養基,其包括,誘導培養基、胚萌發培養基
    和生根培養基,其特征在于,
    所述的誘導培養基,其由以下組分組成:1/2MS基本培養基,蔗糖30~50g/L,瓊脂6~
    8g/L,吲哚丁酸IBA0.3~0.5mg/L;
    所述的胚萌發培養基,其由以下組分組成:1/2MS基本培養基,蔗糖30g~50g/L,瓊脂6g
    ~8g/L,萘乙酸NAA0.2~0.5mg/L,6-芐氨基腺嘌呤6-BA1.2~1.5mg/L;
    所述的生根培養基,其由以下組分組成:1/2MS基本培養基,蔗糖30g~50g/L,瓊脂6g~
    8g/L,吲哚丁酸IBA0.2~0.5mg/L,6-芐氨基腺嘌呤6-BA0.02~0.05mg/L,水解酪蛋白LH0.2
    ~0.4g/L,腺嘌呤Ad4~6mg/L。
    展開

專利技術附圖

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