本發(fā)明公開了一種昆蟲病原線蟲的固體培養(yǎng)方法，其特征在于：具體步驟包括：(a)制備菌種培養(yǎng)基，將昆蟲病原線蟲的共生細(xì)菌活化，將共生細(xì)菌接入菌種培養(yǎng)基；(b)共生細(xì)菌菌液接入固體培養(yǎng)基；(c)在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3?5天后，再接入昆蟲病原線蟲懸浮液；(d)黑暗靜置培養(yǎng)線蟲，培養(yǎng)3周后收獲線蟲。本發(fā)明解決了活體培養(yǎng)方法無法規(guī)模化生產(chǎn)昆蟲病原線蟲的問題，并且固體培養(yǎng)方法的生產(chǎn)成本要明顯低于液體培養(yǎng)方法，固體培養(yǎng)方法生產(chǎn)的線蟲致病力也要明顯高于液體培養(yǎng)方法。市場(chǎng)需求量增大，固體培養(yǎng)方法更具發(fā)展前景，對(duì)昆蟲病原線蟲的規(guī)模化生產(chǎn)和對(duì)地下害蟲的生物防治具有非常重要的意義。

1.一種昆蟲病原線蟲的固體培養(yǎng)方法，其特征在于：具體步驟包括：
(a)制備菌種培養(yǎng)基，準(zhǔn)備將昆蟲病原線蟲的共生細(xì)菌活化，將活化的共生細(xì)菌接入菌
種培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；所述(a)步驟中，菌種培養(yǎng)基，采用LB培養(yǎng)基，LB培養(yǎng)基組分為：蛋白
胨1％，氯化鈉0.5％，酵母0.5％，水98％；
(b)制備共生細(xì)菌菌液，將培養(yǎng)的共生細(xì)菌菌液接入裝在不銹鋼培養(yǎng)盒中的固體培養(yǎng)
基中培養(yǎng)；固體培養(yǎng)基采用的配方為：黃豆粉15％，面粉10％，蛋黃粉1％，蛋白胨1％，植物
油1％，酵母1％，海綿10％，水61％，固體培養(yǎng)基滅菌后使用，滅菌時(shí)間45分鐘，滅菌在100～
140℃濕熱環(huán)境下進(jìn)行；
(c)24℃～26℃條件下，共生細(xì)菌菌液在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3-5天后，再接入昆蟲病原
線蟲懸浮液；
(d)在24℃～26℃條件下，黑暗靜置培養(yǎng)線蟲，培養(yǎng)3周后收獲線蟲，將線蟲連同固體培
養(yǎng)物置于篩網(wǎng)中一起浸泡于裝有清水的較大容器中，靜置分離，再加入清水反復(fù)清洗。
2.如權(quán)利要求1所述一種昆蟲病原線蟲的固體培養(yǎng)方法，其特征在于：所述(b)步驟中，
不銹鋼培養(yǎng)盒為長(zhǎng)方體，不銹鋼培養(yǎng)盒尺寸為長(zhǎng)50cm，寬40cm，高10cm。
3.如權(quán)利要求1所述一種昆蟲病原線蟲的固體培養(yǎng)方法，其特征在于：所述(c)步驟中，
昆蟲病原線蟲懸浮液是指由水，以及分散于水中的昆蟲病原線蟲構(gòu)成的混合物。
4.如權(quán)利要求1所述一種昆蟲病原線蟲的固體培養(yǎng)方法，其特征在于：所述(d)步驟中，
靜置分離時(shí)間1小時(shí)，線蟲沉降到容器底部，將篩網(wǎng)連同固體培養(yǎng)物移走，清洗3～4次，收獲
清潔的線蟲。