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一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-08-19
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310028871.X 
  • 技術(專利)名稱 一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法 
  • 項目單位 北京銀杏德濟生物技術有限公司
  • 發明人 殷勤偉,黃兵 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 沈新儀
  • 發布時間 2021-08-19  
  • 01

    項目簡介

    本發明提出了一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法,包括下列步驟:1)制備均質的間充質干細胞的培養基;2)多種小RNA分子的組合;3)核酸多肽納米粒的組裝和轉染;4)轉決定后的造血干細胞誘導擴增培養基;5)激活多種造血相關的基因,解決了現有技術造血干細胞治療中的細胞配型困難、免疫排斥和造血干細胞數量限制的技術瓶徑的問題。
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  • 02

    說明書

    1.一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法,其特征在于,包括下列步驟:?1)制備均質的間充質干細胞的培養基;?2)多種小RNA分子的組合,所述多種小RNA分子是指miR-138-1,miR-138-2,miR-433,?所述miR-138-1序列相對應的短的發卡DNA序列如下,?CCCUGGCAUGGUGUGGUGGGGCAGCUGGUGUUGUGAAUCAGGCCGUUGCCAAUCAGAGAACGGCUACUUCACAACACCAGGGCCACACCACACUACAGG,?所述miR-138-2序列相對應的短的發卡DNA序列如下:?CGUUGCUGCAGCUGGUGUUGUGAAUCAGGCCGACGAGCAGCGCAUCCUCUUACCCGGCUAUUUCACGACACCAGGGUUGCAUCA,?所述miR-433序列相對應的短的發卡DNA序列如下:?CCGGGGAGAAGUACGGUGAGCCUGUCAUUAUUCAGAGAGGCUAGAUCCUCUGUGUUGAGAAGGAUCAUGAUGGGCUCCUCGGUGUUCUCCAG,?所述miRNA-138-1、miRNA-138-2和miRNA-433合成后根據干粉重量的1:1:1比例要求加以混合配制;?3)核酸多肽納米粒的組裝和轉染;?4)轉決定后的造血干細胞在誘導擴增培養基中培養;?5)激活多種造血相關的基因。?2.如權利要求1所述的一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法,其特征在于:所述步驟1)中培養基是指在無血清的高糖DMEM/F12培養基中添的EGF,FGF-2,PDGF-BB,IGF和TGF-β五因子。?3.如權利要求1所述的一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法,其特征在于:所述步驟4)中誘導擴增培養基是指在無血清的高糖DMEM/F12培養基中添加shh,SCF,TPO,Flt3L,Delta1,IGFBP,Angiopoietin,MBP4,LIF,TGF-β十因子。?4.如權利要求1所述的一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法,其特征在于:所述轉決定后的造血干細胞培養是指在造血干細胞誘導擴增培養基中以5×105/ml的細胞密度進行培養至少3天。?5.如權利要求1所述的一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法,其特征在于:所述激活多種造血相關的基因是指Runx1,Bmi1,HoxB4,Gata1,Gata2,Gfi1,Sall4,Pu.1,Scl,Mcl,C-myc,C-myb,Kcl4,Cxcr4,和Crb。?6.如權利要求1所述的一種能夠大規模并快速高純度地誘導間充質干細胞轉決定成造血干細胞的方法,其特征在于:所述的間充質干細胞的培養基可制造成不同的培養試劑盒,其中包括不同間充質干細胞增殖所需要的細胞增殖因子、細胞分化抑制劑。?
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