本發明涉及棉花子葉離體培養不定芽誘導植株再生的方法，屬于植物組織培養范疇。本發明以棉花種子無菌苗的子葉為外植體材料，接種在附加6-芐基氨基嘌呤3.0mg/L、吲哚乙酸1.0mg/L、2-異戊烯腺嘌呤1.0mg/L、硝酸銀5.0mg/L的不定芽誘導培養基上，不定芽長到1.5cm高度時轉到幼苗生長培養基上，獲得再生植株；珂字棉312品種不定芽的誘導頻率高達70％左右，陸地棉泗棉3號品種不定芽的誘導頻率高達60％左右。棉花子葉離體培養不定芽誘導植株再生技術操作簡便，培養周期短，植株再生頻率高，為規?；_展棉花體細胞培養和農桿菌介導基因轉化提供新的更有效的實用技術。

1.棉花子葉離體培養不定芽誘導植株再生的方法，其特征在于，1)材料選用棉花種子無菌苗的子葉為外植體材料；2)培養基基本培養基：由MS大量元素、MS微量元素與B₅維生素組成，附加葡萄糖30g/L，固化劑phytagel?2g/L；不定芽誘導培養基：在上述基本培養基中添加6-芐基氨基嘌呤3.0mg/L，吲哚乙酸1.0mg/L，2-異戊烯腺嘌呤1.0mg/L和硝酸銀5.0mg/L；幼苗生長培養基：在上述基本培養基中添加6-芐基氨基嘌呤0.1mg/L；培養基在高壓滅菌前用氫氧化鈉和鹽酸調整pH值至5.8；3)培養方法經硫酸脫絨的棉花種子在70％乙醇中消毒2～3min，然后用10％雙氧水處理30～60min，表面消毒處理后的種子在25℃室溫下無菌水中浸泡24h，剝去種皮后置于1/2MS培養基上，15h后切取完整的子葉接種在不定芽誘導培養基上；10d后從子葉的基部切口處誘導產生不定芽；不定芽長到1.5cm高度時轉到幼苗生長培養基上，獲得再生植株；以上培養室溫度為25±1℃，在16h光照條件下培養。