本發明涉及通過影響在內皮細胞(EC)中的某些轉錄因子的強制表達以及在內皮飼養細胞存在下在無血清培養基中培養內皮細胞，來從內皮細胞生成造血多系祖細胞(HMLP)。按照本發明生成的造血多系祖細胞可以產生紅系、淋巴、骨髓和巨核細胞。這些生成的造血多系祖細胞可用于對包括造血狀況等疾病的治療性處理中。

1.一種從人內皮細胞(EC)產生人造血多系祖細胞(HMLP)的方法，所述方法包括在有內
皮飼養細胞的無血清培養基中培養內皮細胞，所述內皮細胞表達以下每種轉錄因子：
Finkel-Biskis-Jinkins鼠骨肉瘤病毒致癌基因同源物B(FOSB)，生長因子獨立1轉錄抑制
物(GFI1)，侏儒相關轉錄因子1(RUNX1)，脾臟病灶形成病毒原病毒整合致癌基因(SPI1)，所
述內皮飼養細胞被轉化以表達腺病毒E4開放閱讀框1(E4ORF1)基因或Akt基因之一。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述內皮細胞選自胎兒、新生兒、成人或內皮祖細
胞。
3.根據權利要求2所述的方法，其中所述內皮細胞選自人臍帶靜脈內皮細胞(HUVEC)或
成人皮膚微血管內皮細胞(hDMEC)。
4.根據權利要求1所述的方法，其中所述內皮飼養細胞是人臍帶靜脈內皮細胞
(HUVEC)，所述人臍帶靜脈內皮細胞(HUVEC)被轉化以表達腺病毒E4開放閱讀框1(E4ORF1)
基因或Akt基因之一。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述內皮細胞被一個或多個載體轉導，所述載體驅
動FOSB、GFI1、RUNX1和SPI1的表達。
6.根據權利要求5所述的方法，其中所述載體中的至少一個還包括可選擇的標記物。
7.根據權利要求6所述的方法，其中所述可選擇的標記物是抗生素抗性標記物、酶標記
物、表位標記物或可視標記物。
8.根據權利要求6所述的方法，其中在存在所述內皮飼養細胞的情況下進行培養之前，
通過選擇表達至少一種可選擇標記物的細胞，根據FOSB、GFI1、RUNX1和/或SPI1的表達來富
集所述內皮細胞。
9.根據權利要求5所述的方法，其中FOSB、GFI1、RUNX1和SPI1中的一種或多種的所述表
達為可誘導的。
10.根據權利要求5所述的方法，其中FOSB、GFI1、RUNX1和SPI1中的一種或多種的所述
表達為瞬時的。
11.根據權利要求1所述的方法，其中所述人造血多系祖細胞可產生紅系、淋巴、骨髓和
巨核細胞。
12.根據權利要求1所述的方法，所述方法還包括基于CD45+細胞的選擇來分離所述人
造血多系祖細胞。
13.根據權利要求12所述的方法，其中所述人造血多系祖細胞是CD45⁺CD34⁺。
14.根據權利要求1所述的方法，其中所述人造血多系祖細胞包括細胞，所述細胞是
CD45⁺Lin-CD45RA^-CD38-CD90⁺CD34⁺或CD45⁺Lin-CD45RA-CD38-CD90-CD34⁺。
15.根據權利要求1所述的方法，其中所述人造血多系祖細胞在移植進入接受者后分化
成造血細胞。
16.根據權利要求1所述的方法，其中培養所述內皮細胞至少五天以產生人造血多系祖
細胞。
17.根據權利要求1所述的方法，其中在內皮飼養細胞存在下在無血清造血培養基中生
長所述內皮細胞，所述培養基包括bFGF、EGF、SCF、FLT3、TPO和IL-6。
18.根據權利要求17所述的方法，其中所述培養基還包括IGF-1、IGF-2和IL-3。
19.根據權利要求17所述的方法，其中所述培養基是造血干細胞培養基。
20.一種根據權利要求1所述的方法生產的人造血多系祖細胞群體，其中所述人造血多
系祖細胞群體包含編碼FOSB、GFI1、RUNX1和SPI1的一個或多個載體。
21.一種組合物，所述組合物包括在藥學上可接受的運載體中的通過根據權利要求1所
述的方法生產的人造血多系祖細胞，其中所述人造血多系祖細胞包含編碼FOSB、GFI1、
RUNX1和SPI1的一個或多個載體。
22.根據權利要求1所述的方法生產的人造血多系祖細胞在制備用于治療造血功能疾
病的藥物中的用途，其中所述人造血多系祖細胞包含編碼FOSB、GFI1、RUNX1和SPI1的一個
或多個載體。
23.根據權利要求22所述的用途，其中所述造血功能疾病選自白血病或淋巴瘤。
24.根據權利要求22所述的用途，其中所述人造血多系祖細胞與接受者自體同源。
25.根據權利要求22所述的用途，其中所述人造血多系祖細胞不會在接受者中引起惡
變。