1.一種非診斷或治療目的的檢驗和計數活體微生物的方法，其特征在
于，包括以下步驟：
1)對待檢樣品進行活菌培養計數，初步篩選出陽性可疑微生物；
2)隨機挑取步驟1)所述的陽性可疑微生物，提取基因組DNA，用目
標微生物的特異性引物進行PCR檢測并計數，所述的活體微生物為長雙歧
桿菌，所述的目標微生物的特異性引物是一引物對，包括上游引物和下游引
物，上游引物的序列是5’-CCA?TCA?TCC?GCT?TTC?G-3’，見序列表中SEQ?ID?
NO.1所示；下游引物的序列是5’-TGG?CAG?ACA?GGA?CCG?ATG-3’，見序
列表中SEQ?ID?NO.2所示。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述的進行活菌培
養計數的方法是平板計數法或最大可能數法。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述的待檢樣品是
可溶性固體、液體樣品，不溶性固體、半固體或粘稠性液體樣品。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述的初步篩選出
陽性可疑微生物的方法是根據目標微生物的肉眼外觀形態特點，初步區分目
標微生物，標記為陽性可疑微生物；或者是針對目標微生物的特異代謝產物
加入化學顯色試劑初步區分目標微生物，標記為陽性可疑微生物。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)所述的陽性可疑微
生物的挑取方法是用無菌槍頭吸取。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)所述的提取基因組
DNA的方法包括以下步驟：用滅菌槍頭吸取微生物體，將微生物體懸浮于
抽提試劑中，80～100℃水浴2～30分鐘；所述的抽提試劑是：0.1～5×PCR緩
沖液，0.002～0.2mol/L氫氧化鈉溶液。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中，同時在平板空
白處吸取培養基作為陰性空白對照，監測PCR污染；以目標微生物體懸浮
液作陽性對照，監測PCR試劑的有效性；同時利用能夠特異性擴增培養平
板上生長出的所有微生物的通用引物作為PCR檢測的陽性標志。
8.一引物對，包括上游引物和下游引物，上游引物的序列是5’-CCA?TCA?
TCC?GCT?TTC?G-3’，見序列表中SEQ?ID?NO.1所示；下游引物的序列是
5’-TGG?CAG?ACA?GGA?CCG?ATG-3’，見序列表中SEQ?ID?NO.2所示。
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