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黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料及用其生產(chǎn)杏鮑菇的方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-07-28
  • 技術(shù)成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201410405340.2 
  • 技術(shù)(專利)名稱 黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料及用其生產(chǎn)杏鮑菇的方法 
  • 項目單位 甘肅省科學(xué)院生物研究所
  • 發(fā)明人 路等學(xué),韓融冰,趙玉卉,宋建華,宋建雲(yún) 
  • 行業(yè)類別 健康用品-營養(yǎng)保健品
  • 技術(shù)成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 錢煒
  • 發(fā)布時間 2021-07-28  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明公開了一種黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料及用其生產(chǎn)杏鮑菇的方法,以解決生產(chǎn)杏鮑菇用的原料短缺以及現(xiàn)有方法生產(chǎn)杏鮑菇產(chǎn)量低的問題。該方法包括杏鮑菇菌種純化與復(fù)壯、杏鮑菇液體菌種制備、復(fù)合固體培養(yǎng)料制備及杏鮑菇栽培步驟。本發(fā)明把黃芪秸稈與農(nóng)作物秸稈復(fù)合成適宜杏鮑菇生長的固體復(fù)合培養(yǎng)料,以杏鮑菇液體菌種為栽培種生產(chǎn)杏鮑菇。在保護(hù)環(huán)境的同時為人們提供優(yōu)質(zhì)的菌類產(chǎn)品,可產(chǎn)生良好的社會、經(jīng)濟(jì)、生態(tài)效益。有利于食用菌生產(chǎn)企業(yè)調(diào)整產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu),增加新產(chǎn)品,使食用菌產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料,其特征在于:它以黃芪秸稈和芪頭為主料,以玉米秸稈、玉米芯為輔料,按以下重量份原料加水制成,黃芪秸稈和黃芪芪頭25.0份~35.0份、玉米秸稈和玉米芯25.0份~35.0份、棉籽殼15.0份~25.0份、木屑25.0份~35.0份、麥麩10.0份~15.0份、玉米粉2.0份~3.0份、黃豆粉1.0份~3.0份、石膏1份、石灰1份、磷酸氫二鉀0.05份-0.15份、磷酸二氫鉀0.05份-0.15份、硫酸鎂0.05份-0.15份,料水比為1:1.25-1.50,黃芪秸稈和黃芪芪頭的重量比為1:1,玉米秸稈和玉米芯的重量比為1:1。2.用權(quán)利要求1所述黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料生產(chǎn)杏鮑菇的方法,其特征在于它包括下列步驟:A、杏鮑菇菌種純化與復(fù)壯,B、杏鮑菇液體菌種制備,C、杏鮑菇栽培;其中步驟A杏鮑菇菌種純化與復(fù)壯過程如下:a.杏鮑菇的原生質(zhì)體化與純化:將杏鮑菇(Pleurotuseryngii)的雙核菌絲體接種于鋪有玻璃紙環(huán)的加富PDA培養(yǎng)基上,20-28℃培養(yǎng)4-5天;菌絲長滿玻璃紙環(huán)時,無菌操作將玻璃紙環(huán)連同菌絲體轉(zhuǎn)入4-6ml纖維素酶與蝸牛酶的混合酶液中,在32-36℃溫度、350-450rpm轉(zhuǎn)速的搖床中酶解6-10h;酶解液用濃度為0.5-0.7摩爾的MgSO4·7H2O溶液稀釋,MgSO4·7H2O溶液的用量為酶解液容積的2倍,過濾;濾液以2400-2600rpm轉(zhuǎn)速離心;取中層液加MgSO4溶液制成凈化原生質(zhì)體懸液;取原生質(zhì)體懸液加入PDA培養(yǎng)液,在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中于22-25℃溫度下靜置培養(yǎng);取經(jīng)過PDA培養(yǎng)液培養(yǎng)46-50h的原生質(zhì)體液體培養(yǎng)液涂附有綜合PDA培養(yǎng)基的平板,22-25℃溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)8-12天,當(dāng)再生菌落出現(xiàn)時,隨即轉(zhuǎn)管培養(yǎng),菌絲長滿試管后進(jìn)行鏡檢;菌絲體無鎖狀聯(lián)合的為單核體X,具有鎖狀聯(lián)合的為雙核體Y,雙核體Y擴(kuò)大培養(yǎng),保存;b.單核體交配培養(yǎng):將兩個擬交配的步驟a得到的單核體X相距約0.5cm接種于附有綜合PDA培養(yǎng)基的平板上,25℃黑暗條件下倒置培養(yǎng)5-7d;當(dāng)兩菌落相交后5-7d,取兩菌落交界處及其外緣的菌絲體,轉(zhuǎn)到附有綜合PDA培養(yǎng)基的平板中培養(yǎng),菌絲萌發(fā)3d后顯微鏡檢查,挑出具有鎖狀聯(lián)合的雙核菌絲擴(kuò)大培養(yǎng),保存;c.出菇試驗:用步驟a擴(kuò)大培養(yǎng)的雙核體Y和步驟b擴(kuò)大培養(yǎng)的雙核菌絲交配獲得的雙核體新菌株作出菇試驗;評價選優(yōu),對理想子實體個體組織分離,雙核化穩(wěn)定,以生物學(xué)性狀及產(chǎn)量穩(wěn)定的菌種作為生產(chǎn)母種,保存?zhèn)溆?稱杏鮑菇一級種。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料生產(chǎn)杏鮑菇的方法,其特征在于:所述步驟a中纖維素酶與蝸牛酶的混合酶液的質(zhì)量百分比濃度為1.0%。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料生產(chǎn)杏鮑菇的方法,其特征在于:所述步驟a中制備凈化原生質(zhì)體懸液取中層液的過程為,取中層液2.0ml加3-5ml的濃度為0.5-0.7摩爾的MgSO4溶液搖勻,離心、洗滌,如此重復(fù)洗滌2次;最后取中層液2.0ml加8.0ml的濃度為0.5-0.7摩爾的MgSO4溶液制成凈化原生質(zhì)體懸液。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料生產(chǎn)杏鮑菇的方法,其特征在于:所述步驟a中取原生質(zhì)體懸液靜置培養(yǎng)過程為,取原生質(zhì)體懸液2.0ml加入7-9ml含0.4摩爾蔗糖的PDA培養(yǎng)液培養(yǎng);然后取原生質(zhì)體液體培養(yǎng)液0.2ml涂附有綜合PDA培養(yǎng)基的平板或者涂含0.4摩爾蔗糖的附有綜合PDA培養(yǎng)基的平板。6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料生產(chǎn)杏鮑菇的方法,其特征在于所述步驟B的具體過程如下:(1)制作二級固體發(fā)酵原種培養(yǎng)基:將顆粒狀木屑和麥麩過篩,選用0.425-0.850mm之間的顆粒為原料;按二級固體發(fā)酵原種培養(yǎng)基的配方混合原料,攪拌均勻,使含水量在60-65%之間;將二級固體發(fā)酵原種培養(yǎng)基裝入750ml的菌種瓶中,壓緊、壓平,每瓶裝濕料400-450g或干料180-240g,蓋上棉塞,0.13mpa-0.15mpa壓力下,滅菌80-100min;上述二級固體發(fā)酵原種培養(yǎng)基的重量配比為:木屑35.0份~45.0份、麥麩40.0份~55.0份、玉米粉2.0份~6.0份、黃豆粉1.0份~5.0份,磷酸氫二鉀0.05份-0.15份、磷酸二氫鉀0.05份-0.15份、硫酸鎂0.05份-0.15份;料水比為1:1.25-1.50;(2)杏鮑菇二級固體發(fā)酵原種的培育:將權(quán)利要求1中的杏鮑菇一級種接種于步驟(1)的杏鮑菇二級固體發(fā)酵原種培養(yǎng)基中,在23-25℃溫度下培養(yǎng),菌絲長滿后即成;(3)液體菌種制作:將杏鮑菇液體菌種培養(yǎng)基分裝到三角瓶中,500ml三角瓶中裝杏鮑菇液體菌種培養(yǎng)基300ml,1000ml三角瓶裝中裝杏鮑菇液體菌種培養(yǎng)基600ml;蓋上棉塞,在0.13mpa-0.14mpa壓力下滅菌30min;待培養(yǎng)基溫度降至30℃以下時,接入步驟(2)得到的杏鮑菇二級固體發(fā)酵原種,500ml三角瓶中接入2接種勺杏鮑菇二級固體發(fā)酵原種,1000ml三角瓶中接入4接種勺杏鮑菇二級固體發(fā)酵原種;接完種的三角瓶在23-28℃溫度,120-180rpm轉(zhuǎn)速下振蕩器振蕩培養(yǎng)3-8天,成為杏鮑菇液體菌種;上述杏鮑菇液體菌種培養(yǎng)基的重量配比為:麥麩2.0%~5.0%、玉米粉1.0%~3.0%、黃豆粉1.0%~2.0%、蛋白胨0.10%~0.2%、磷酸氫二鉀0.05%-0.15%、磷酸二氫鉀0.05%-0.15%、硫酸鎂0.05%-0.10%,余量為水;(4)接種:將杏鮑菇二級固體發(fā)酵原種在無菌條件下?lián)v碎,并入盛有800ml無菌水的1000ml滅菌三角瓶中,搖勻,在酒精火焰的保護(hù)下,到入發(fā)酵罐中,接種量為100L培養(yǎng)基接二級固體發(fā)酵原種2-5L;(5)培養(yǎng):在24-26℃溫度、罐壓0.02-0.04mpa的條件下,培養(yǎng)時間3-8d,經(jīng)檢驗合格后,為杏鮑菇液體菌種。7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料生產(chǎn)杏鮑菇的方法,其特征在于:所述步驟C的具體過程如下:(1)菌包冷卻:將權(quán)利要求1的黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料滅菌,將料袋置于潔凈處冷卻;在裝袋滅菌冷卻的全過程中,料袋盛放在周轉(zhuǎn)筐內(nèi),減少搬動,降低污染率;(2)液體菌種接種:當(dāng)料袋溫度冷卻至28℃以下時,即可置于接種箱或接種室內(nèi)接種;常規(guī)方法消毒,嚴(yán)格按無菌操作接種,直立出菇一頭接種,墻式出菇兩頭接種,細(xì)棒長袋橫臥出菇于袋身同側(cè)打三眼接種;每個接種點用接種槍移入杏鮑菇液體菌種5.0ml,封口;(3)發(fā)菌管理:接種完畢后,及時搬入事先清掃消毒的培養(yǎng)室內(nèi)發(fā)菌;發(fā)菌期間的主要工作是控溫、降濕、通風(fēng)、遮光、翻堆和清除雜菌;培養(yǎng)室氣溫應(yīng)控制在20-26℃之間,初期氣溫25℃;菌袋中的料溫上升后,室溫應(yīng)調(diào)低至20-25℃;整個發(fā)菌階段,料溫都不要超過28℃;料溫過高,輕則產(chǎn)生熱害阻礙發(fā)菌,影響后期產(chǎn)量;重則燒菌,導(dǎo)致栽培失敗;在發(fā)菌階段,培養(yǎng)室應(yīng)遮光,維持黑暗,空氣相對濕度控制在70%以內(nèi),經(jīng)常通風(fēng)換氣,保持空氣新鮮;每隔10d翻堆一次,使菌袋發(fā)菌均勻,同時撿出污染菌袋;為加快菌絲生長,扎繩封口的菌袋應(yīng)在菌絲封面并吃料2-3cm后扎眼透氣;氣溫較高時,應(yīng)注意防蟲;在適宜的環(huán)境條件下,菌絲經(jīng)40d可長滿菌袋;(4)催蕾:菌絲長滿袋后,繼續(xù)培養(yǎng)10d,積累更多的養(yǎng)分;當(dāng)氣溫下降至10—18℃時,就可進(jìn)行催蕾管理;為了使其出菇整齊一致,可先進(jìn)行搔菌處理;具體做法是:用小勺刮去袋口表層老菌種,并使袋口料面變平;搔菌時間在菌絲滿袋后即可進(jìn)行,因搔菌后還需要10d的菌絲恢復(fù)時間,菌袋在此期間可進(jìn)一步成熟;如果袋口或菌袋中部已有原基形成,則不再進(jìn)行搔菌;可以直接進(jìn)入出菇管理;搔菌后要進(jìn)行保濕管理,用塑膜將袋口覆蓋,或用紙將套環(huán)口封住;約過10d,當(dāng)料面重新長出新的白色氣生菌絲時,即可噴水增濕催蕾;催蕾期間溫度控制在10-18℃之間,低于8℃或高于20℃都難于形成原基;催蕾期間,空氣濕度應(yīng)維持在90%-95%,增加散射光刺激,加強(qiáng)通風(fēng),保持空氣新鮮;經(jīng)過3-6d,即可出現(xiàn)白色原基,原基進(jìn)一步分化形成菇蕾;(5)出菇管理:當(dāng)原基分化形成1-2cm小菇蕾時,應(yīng)及時開袋進(jìn)行出菇期的管理;開袋過早,原基難于形成或出菇不整齊;開袋過遲,子實體己在袋內(nèi)長大,會形成畸形菇,嚴(yán)重時子實體會萎縮腐爛;將袋口塑膜向外翻卷下折至高于料面2—3cm,露出小菇蕾;如果幼菇過密,適當(dāng)疏蕾,汰劣存優(yōu);短袋每袋留3—4個,長袋每穴留1-3朵,以保持菇體形美、個大,商品率高;出菇階段,必須注意溫度、濕度、光照和通風(fēng)的調(diào)控。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用黃芪秸稈和芪頭固體復(fù)合培養(yǎng)料生產(chǎn)杏鮑菇的方法,其特征在于:所述步驟(4)催蕾中最佳催蕾溫度為10—15℃。
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