表面修飾的碳納米點(diǎn)的制備方法和作為熒光探針檢測(cè)Cu及谷胱甘肽的應(yīng)用，本發(fā)明涉及Cu和谷胱甘肽的檢測(cè)方法，本發(fā)明是要解決現(xiàn)有的檢測(cè)Cu熒光探針易受其它金屬離子干擾、制備成本高、制備步驟復(fù)雜的技術(shù)問(wèn)題。本發(fā)明以三乙烯四胺修飾的碳納米點(diǎn)作為熒光探針檢測(cè)Cu和谷胱甘肽，熒光探針的制備方法是將檸檬酸和尿素在水溶液中微波加熱，獲得的碳納米點(diǎn)加入到含有三乙烯四胺的乙醇溶液回流，制得熒光探針。該制備方法簡(jiǎn)單、反應(yīng)條件溫和、成本低。檢測(cè)方法：熒光探針與Cu的相互作用，使TCDs熒光猝滅并形成TCDs?Cu復(fù)合物，TCDs?Cu復(fù)合物進(jìn)一步與谷胱甘肽相互作用，并使TCDs的熒光恢復(fù)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)Cu及谷胱甘肽的檢測(cè)。該探針可檢測(cè)水溶液及生命體中的銅離子和谷胱甘肽。

1.表面修飾的碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于該方法按以下步驟進(jìn)行：
一、按碳納米點(diǎn)與三乙烯四胺的質(zhì)量比為1:(0.1～10)將碳納米點(diǎn)與三乙烯四胺加入
到乙醇中混合均勻，得到混合物；
二、將混合物加熱回流反應(yīng)5～48h，得到粗產(chǎn)物；
三、將粗產(chǎn)物旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，再用苯洗滌粗產(chǎn)物1～5次，離心分離后，用超純水溶
解固相物，得到溶液，再將溶液過(guò)濾；將濾液真空干燥，即得到表面修飾的碳納米點(diǎn)；
其中步驟一中所述的碳納米點(diǎn)是由尿素和檸檬酸按質(zhì)量比1:(1～6)的比例混合，然后
通過(guò)微波加熱制備的一種富含碳的納米顆粒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的表面修飾的碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于步驟一中碳納
米點(diǎn)與三乙烯四胺的質(zhì)量比為1:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的表面修飾的碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于步驟二中加熱
回流反應(yīng)時(shí)間為24h。
4.權(quán)利要求1制備的表面修飾的碳納米點(diǎn)的應(yīng)用，其特征在于表面修飾的碳納米點(diǎn)作
為熒光探針檢測(cè)二價(jià)銅離子和谷胱甘肽；其中銅離子和谷胱甘肽為水溶液中的銅離子和谷
胱甘肽或生命體中的銅離子和谷胱甘肽。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的表面修飾的碳納米點(diǎn)的應(yīng)用，其特征在于定性檢測(cè)銅離子和
谷胱甘肽的方法按以下步驟進(jìn)行：
(1)將表面修飾的碳納米點(diǎn)溶于超純水中，形成TCDs水溶液，并測(cè)定溶液的熒光光譜；
(2)將上述的TCDs水溶液與待測(cè)水溶液Ⅰ混合，測(cè)定其熒光光譜，如果熒光強(qiáng)度顯著減
弱，則可以判定待測(cè)水溶液Ⅰ含有銅離子，形成了TCDs-Cu²⁺復(fù)合物；否則待測(cè)水溶液Ⅰ沒(méi)有銅
離子；
(3)將TCDs-Cu²⁺復(fù)合物的溶液與待測(cè)水溶液Ⅱ混合，測(cè)定其熒光光譜，如果熒光強(qiáng)度得
以恢復(fù)，則可以判定待測(cè)水溶液Ⅱ含有谷胱甘肽，形成TCDs-Cu²⁺-GSH；否則待測(cè)水溶液Ⅱ中
沒(méi)有谷胱甘肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的表面修飾的碳納米點(diǎn)的應(yīng)用，其特征在于定量檢測(cè)水溶液中
銅離子和谷胱甘肽的方法為標(biāo)準(zhǔn)曲線法，具體如下：
(1)配制不同濃度的含Cu²⁺的標(biāo)準(zhǔn)系列樣品Ⅰ，分別加入表面修飾的碳納米點(diǎn)溶液，并調(diào)
節(jié)至pH值6.0～8.3之間，并測(cè)試溶液的熒光光譜，讀出最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值，以銅
離子的濃度為橫坐標(biāo)、以最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)作圖，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)用與標(biāo)準(zhǔn)樣品Ⅰ相同的方法，測(cè)試待測(cè)溶液中加入表面修飾的碳納米點(diǎn)溶液后的熒
光光譜，根據(jù)最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出銅離子的濃度值；
(3)配制不同濃度的含谷胱甘肽的標(biāo)準(zhǔn)系列樣品Ⅱ，分別加入TCDs-Cu²⁺混合溶液，并調(diào)
節(jié)至pH值6.0～8.3之間，并測(cè)試溶液的熒光光譜，讀出最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值，以谷
胱甘肽的濃度為橫坐標(biāo)、以最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)作圖，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(4)用與標(biāo)準(zhǔn)樣品Ⅱ相同的方法，測(cè)試待測(cè)溶液中加入TCDs-Cu²⁺混合溶液后的熒光光
譜，根據(jù)最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出谷胱甘肽的濃度值。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的表面修飾的碳納米點(diǎn)的應(yīng)用，其特征在于生命體中的銅離子
和谷胱甘肽的檢測(cè)方法，按以下步驟進(jìn)行：
(1)將待測(cè)的生命體放置到含有表面修飾的碳納米點(diǎn)水溶液中培養(yǎng)1～6h，然后用熒光
顯微鏡檢測(cè)生命體的活細(xì)胞；
(2)再把用TCDs培養(yǎng)后的生命體放入待測(cè)溶液Ⅰ中培養(yǎng)1～6h后，用熒光顯微鏡檢測(cè)生
命體的活細(xì)胞；
(3)進(jìn)一步把TCDs-Cu²⁺培養(yǎng)后生命體放入待測(cè)溶液Ⅱ中培養(yǎng)1～6h后，再用熒光顯微鏡
檢測(cè)生命體的活細(xì)胞；
(4)如果在步驟(2)出現(xiàn)熒光強(qiáng)度顯著減弱，則可以判定待測(cè)溶液Ⅰ含有銅離子；
(5)如果在步驟(3)出現(xiàn)熒光強(qiáng)度恢復(fù)，則可以判定待測(cè)水溶液Ⅱ中含有谷胱甘肽。