本發明公開了一種端粒長度測量方法，該方法需使用到兩種表面增強拉曼散射探針粒子，一種為能與端粒序列雜交的端粒SERS探針粒子，另一種為能與著絲粒序列雜交的著絲粒SERS探針粒子。將端粒SERS探針和著絲粒SERS探針加入到用固定劑固定好的細胞樣品上，使端粒SERS探針和著絲粒SERS探針能分別通過它們表面修飾的DNA序列雜交到染色體中的端粒和著絲粒上。利用端粒SERS探針的SERS信號強度與著絲粒SERS探針的SERS信號強度之比表征端粒的相對長度。R越大表示細胞的端粒越長，R越小表示細胞的端粒越短。采用原位雜交表面增強拉曼散射法，具有實驗成本低、周期短、特異性好、準確度高的優點。

1.一種端粒長度測量方法，其特征在于：利用原位雜交SERS法實現端粒長度測量，將端
粒SERS探針粒子和著絲粒SERS探針粒子加入到用固定劑固定好的待測細胞上，使端粒SERS
探針粒子和著絲粒SERS探針粒子分別通過它們表面修飾的DNA序列原位雜交到待測細胞的
端粒和著絲粒上，利用端粒SERS探針粒子的SERS信號強度與著絲粒SERS探針粒子的SERS信
號強度之比R_T/C表征待測細胞的端粒長度，R_T/C越小表示待測細胞的端粒長度越短；所述端
粒SERS探針粒子是一種能與細胞的端粒序列雜交的SERS探針粒子，所述著絲粒SERS探針粒
子是一種能與細胞的著絲粒序列雜交的SERS探針粒子；方法包括如下步驟：
步驟一：制備球形金納米粒子A；
步驟二：在粒子A表面修飾與細胞的端粒互補的DNA序列5'-SH(CH₂)
₆TTTTTTTTTTCCCTAACCCTAACCCTAA-3'，得到能與細胞的端粒序列雜交的金納米粒子B₁；在粒
子A表面修飾與細胞的著絲?；パa的DNA序列5'-SH(CH₂)₆TTTTTTTTTTTAGCTTCTGTCTAGTTT-
3'，得到能與細胞的著絲粒序列雜交的金納米粒子B₂；
步驟三：在粒子B₁表面的空位上修飾拉曼報告分子，得到能產生SERS信號且能與細胞的
端粒序列雜交的金納米粒子C₁；在粒子B₂表面的空位上修飾拉曼報告分子，得到能產生SERS
信號且能與細胞的著絲粒序列雜交的金納米粒子C₂；要求在粒子B₁和粒子B₂表面修飾的拉
曼報告分子不同，使得粒子C₁和粒子C₂產生的SERS信號不同；
步驟四：在粒子C₁表面包覆一層銀殼形成端粒SERS探針粒子D₁，銀殼將粒子D₁上的拉曼
報告分子和富T堿基的一段DNA序列包埋在內，而用于雜交的一段DNA序列仍舊暴露在銀殼
外；在粒子C₂表面包覆一層銀殼形成著絲粒SERS探針粒子D₂，銀殼將粒子D₂上的拉曼報告分
子和富T堿基的一段DNA序列包埋在內，而用于雜交的一段DNA序列仍舊暴露在銀殼外；銀殼
的厚度為2～3nm，通過銀殼進一步增強SERS信號，但同時又不影響DNA序列的雜交功能；
步驟五：用固定劑固定好待測的細胞；
步驟六：將粒子D₁和粒子D₂同時加入到用固定劑固定好的待測細胞中，使粒子D₁和粒子
D₂分別通過它們表面修飾的DNA序列雜交到待測細胞的端粒和著絲粒上；
步驟七：洗去待測細胞上多余的粒子D₁和粒子D₂；
步驟八：利用共焦拉曼顯微鏡分析待測細胞上的SERS光譜信號，進行SERS光譜和圖像
的采集；
步驟九：利用端粒SERS探針粒子的SERS信號強度與著絲粒SERS探針粒子的SERS信號強
度之比R_T/C表征待測細胞的端粒長度，R_T/C越小表示待測細胞的端粒長度越短。
2.根據權利要求1所述的端粒長度測量方法，其特征在于：所述步驟二中，DNA序列5'-
SH(CH₂)₆TTTTTTTTTTCCCTAACCCTAACCCTAA-3'和DNA序列5'-SH(CH₂)
₆TTTTTTTTTTTAGCTTCTGTCTAGTTT-3'的5'端均修飾了巰基，以使得兩種DNA序列能夠通過金
硫鍵牢固地、共價地連接到粒子A的表面。
3.根據權利要求1所述的端粒長度測量方法，其特征在于：所述步驟三中，兩種拉曼報
告分子均含巰基，以使得拉曼報告分子能夠通過金硫鍵牢固地、共價地連接到粒子A的表
面。