本發(fā)明屬于生物技術(shù)中熒光蛋白質(zhì)材料領(lǐng)域，具體涉及一種制備別藻藍(lán)蛋白三聚體熒光蛋白質(zhì)的方法。首先將別藻藍(lán)蛋白α亞基脫輔基蛋白基因與藻膽素生物合成酶基因hol和pcyA克隆到一個(gè)表達(dá)載體中；其次將別藻藍(lán)蛋白β亞基脫輔基蛋白基因與色基裂合酶基因cpcS和cpcU克隆到另一個(gè)載體上，將兩個(gè)表達(dá)載體同時(shí)轉(zhuǎn)化大腸桿菌，篩選出同時(shí)表達(dá)上述基因的工程菌，即為別藻藍(lán)蛋白三聚體熒光蛋白。本發(fā)明不使用藻類為原料而是利用大腸桿菌生產(chǎn)重組光活性蛋白，大腸桿菌易于培養(yǎng)，生長快，可以大大縮短生產(chǎn)周期；與藻類相比，大腸桿菌細(xì)胞壁易于破碎，純化過程可以節(jié)約能源，利用率高。

1.一種制備別藻藍(lán)蛋白三聚體熒光蛋白的方法，其特征在于：首先將
別藻藍(lán)蛋白α亞基脫輔基蛋白基因與藻膽素生物合成酶基因ho1和pcyA克
隆到一個(gè)表達(dá)載體中；其次將別藻藍(lán)蛋白β亞基脫輔基蛋白基因與色基裂
合酶基因cpcS和cpcU克隆到另一個(gè)載體上，將兩個(gè)表達(dá)載體同時(shí)轉(zhuǎn)化大
腸桿菌，篩選出同時(shí)表達(dá)上述基因的工程菌，即為別藻藍(lán)蛋白三聚體熒光
蛋白；
所述別藻藍(lán)蛋白α亞基脫輔基蛋白基因與藻膽素生物合成酶基因ho1
和pcyA來源Synechocystis?sp.PCC6803，并且克隆載體為pCDFDuet；別
藻藍(lán)蛋白β亞基脫輔基蛋白基因與色基裂合酶基因cpcS和cpcU來源
Synechocystis?sp.PCC6803，并且克隆載體為pRSFDuet；
所述別藻藍(lán)蛋白三聚體熒光蛋白采用Ni柱親和吸附，凝膠色譜法脫鹽，
蛋白濃縮及凝膠色譜分離，即得到純化后的別藻藍(lán)蛋白三聚體熒光蛋白；
別藻藍(lán)蛋白α亞基脫輔基蛋白基因來源Synechocystis?sp.PCC6803；
別藻藍(lán)蛋白β亞基脫輔基蛋白基因來源Synechocystis?sp.PCC6803。