本發明公開一種重組黑曲霉單寧酶的表達及純化方法。本發明通過PCR方法將編碼黑曲霉單寧酶蛋白的核苷酸序列從黑曲霉基因組中擴增出來，克隆到大腸桿菌表達載體pET-32a(+)，構建表達載體pET32a-Tan，采用化學轉化法轉化入大腸桿菌BL21獲得重組菌株，采用液態培養的方法進行重組單寧酶的誘導表達。本發明采用Ni親和層析純化重組黑曲霉單寧酶，純化后的單寧酶活性為13.2U/mL。本發明的重組黑曲霉單寧酶具有明顯的生物學活性可以有效的降解水解單寧和沒食子酸丙酯。

1.一種重組表達的黑曲霉單寧酶，其特征在于黑曲霉單寧酶編碼的基因如SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列；其所對應的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。2.權利要求1所述黑曲霉單寧酶的表達方法，其特征在于通過表達載體pET32a-Tan在大腸桿菌菌株BL21中采用IPTG進行誘導表達，采用裂解法釋放單寧酶后進行純化得到重組黑曲霉單寧酶。3.權利要求2所述黑曲霉單寧酶的表達方法，其中所述的純化為：采用5?mL?Ni-NTA柱純化蛋白，50?mL?NPI-10平衡柱子，流速為5?mL/min；加入蛋白粗提物，流速為2?mL/min，50?mL?NPI-20洗脫雜蛋白，流速為5?mL/min，30?mL?NPI-250洗脫單寧酶蛋白，流速為1?mL/min，收集各步洗脫液，SDS-PAGE分析蛋白純化情況。4.權利要求1所述重組表達的黑曲霉單寧酶在作為降解植物性飼料中的單寧，降低對單胃動物體內胰蛋白酶、淀粉酶消化酶的抑制，提高飼料中營養物質消化率飼料方面的應用。