本發(fā)明涉及一種新型β-葡萄糖苷酶及其編碼基因和應(yīng)用。本發(fā)明還涉及含有所述編碼基因的表達(dá)載體和宿主細(xì)胞。本發(fā)明還涉及利用所述β-葡萄糖苷酶將底物水解為簡單糖的方法。本發(fā)明的β-葡萄糖苷酶具有常溫活性最高及中性及弱堿性條件下穩(wěn)定性好的特點，可良好地應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。

1.一種分離的多肽，其特征在于，該多肽選自下組：?(a)氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示的多肽；?(b)氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示但其中第723位為Leu的多肽；?(c)氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示但其中第65位為Ala的多肽；或?(d)氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示但其中第26位后面插入一個氨基酸Gly。?2.一種分離的多核苷酸，其特征在于，其是編碼如權(quán)利要求1所述多肽的多核苷酸。?3.如權(quán)利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，該多核苷酸編碼如SEQ?IDNO:2所示氨基酸序列的多肽。?4.如權(quán)利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，該多核苷酸的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，或如SEQ?ID?NO:1中從5’端第77位堿基起的序列片段；所述序列片段由SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:4的引物擴(kuò)增獲得。?5.一種載體，其特征在于，它含有權(quán)利要求2-4任一所述的多核苷酸。?6.一種遺傳工程化的宿主細(xì)胞，其特征在于，它含有權(quán)利要求5所述的載體，或其基因組中整合有權(quán)利要求2-4任一所述的多核苷酸。?7.一種權(quán)利要求1所述的多肽的制備方法，其特征在于，該方法包含：?(a)培養(yǎng)權(quán)利要求6所述的宿主細(xì)胞；?(b)從培養(yǎng)物中分離出權(quán)利要求1所述的多肽。?8.權(quán)利要求1所述的多肽的用途，用于形成簡單糖。?9.如權(quán)利要求8的用途，所述的多肽用于水解糖苷鍵。?10.如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于，所述的多肽水解選自下述底物的糖苷鍵：纖維二糖、芳基葡萄糖苷或烷基葡萄糖苷。?11.如權(quán)利要求10所述的用途，其特征在于，所述的底物選自水楊苷、對硝基苯-β-D-葡萄糖苷或?qū)ο趸嚼w維二糖苷。?12.權(quán)利要求1所述的多肽的用途，用于：?作為以纖維素為原料的乙醇發(fā)酵的添加物；?作為食品工業(yè)中調(diào)節(jié)風(fēng)味的添加物；?作為醫(yī)藥保健品的添加物。?13.一種組合物，其特征在于，它含有安全有效量的權(quán)利要求1所述的多肽以及食品工業(yè)上可接受的載體。?14.如權(quán)利要求13的組合物，其特征在于，還含有調(diào)節(jié)酶活性的添加物。?15.如權(quán)利要求14的組合物，其特征在于，所述的調(diào)節(jié)酶活性的添加物是提高酶活性的添加物，選自：K⁺、Mg²⁺、Al³⁺、Mn²⁺、Ca²⁺、Co²⁺、Ni²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺，或可水解形成K⁺、Mg²⁺、Al³⁺、Mn²⁺、Ca²⁺、Co²⁺、Ni²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺的物質(zhì)。?16.如權(quán)利要求15的組合物，其特征在于，所述的調(diào)節(jié)酶活性的添加物選自Mg²⁺、Co²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺、Ni²⁺，或可水解形成Mg²⁺、Co²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺、Ni²⁺的物質(zhì)。?17.如權(quán)利要求14的組合物，其特征在于，所述的調(diào)節(jié)酶活性的添加物是抑制酶活性的添加物：選自Ag⁺、Cu²⁺、Ba²⁺、EDTA、Tris-Cl，或可水解形成Ag⁺、Cu²⁺、Ba²⁺、EDTA、Tris-Cl的物質(zhì)。?18.如權(quán)利要求17的組合物，其特征在于，所述的調(diào)節(jié)酶活性的添加物選?自Cu²⁺、Ag⁺，或可水解形成Cu²⁺、Ag⁺的物質(zhì)。?19.一種形成簡單糖的方法，其特征在于，該方法包含：在pH4.5-8.5、溫度10-50℃條件下，用權(quán)利要求1所述的多肽處理待水解的底物。?20.如權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于，所述的底物選自：纖維二糖、芳基葡萄糖苷或烷基葡萄糖苷。?21.如權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于，用權(quán)利要求1所述的多肽處理的同時，還加入調(diào)節(jié)酶活性的添加物。?