本發(fā)明公開了一種檢測豬偽狂犬病毒熒光定量PCR試劑盒及應用，該試劑盒包括：a)DNA裂解液，b)Taq DNA聚合酶，c)標準陽性模板含有pG-HB的核苷酸序列，d)熒光定量反應液含有正相、反相引物和熒光探針序列，該試劑盒方法簡便，定量準確，檢測速度快，可同時進行多通量的樣品檢測。

1.?一種檢測豬偽狂犬病毒熒光定量PCR試劑盒，該試劑盒包括a)DNA裂解液，b)Taq?DNA聚合酶，c)標準陽性模板，d)熒光定量反應液，其特征是：熒光定量反應液含有引物和熒光探針，引物為正向引物和反向引物，正向引物為SEQ?ID?NO：1，反向引物為SEQ?ID?NO：2，熒光探針序列為SEQ?ID?NO：3，熒光探針5′端標記FAM，3′端標記ROX基團，標準陽性模板pG-HB是含有豬偽狂犬病毒毒株gE基因167個核苷酸片段構(gòu)成的pGEM-T載體，且該載體可在大腸桿菌DH5α中增殖。2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測豬偽狂犬病毒熒光定量PCR試劑盒，其特征是：熒光定量反應液是由PCR10×buffer，10μmol/L的正向引物和反向引物，1μmol/L熒光探針，25mmol/L?MgCl₂，10mmol/L?dNTPs和無菌雙蒸水組成。3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測豬偽狂犬病毒熒光定量PCR試劑盒，其特征是：標準陽性模板pG-HB的核苷酸序列為：SEQ?ID?NO：4。4.?權(quán)利要求1所述的一種檢測豬偽狂犬病毒的熒光定量PCR試劑盒在豬偽狂犬病毒定量檢測中的應用。