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抗MRJP4的配對單克隆抗體、檢測MRJP4的ELISA試劑盒和膠體金免疫試紙

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2022-01-10
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN202010049812.0 
  • 技術(專利)名稱 抗MRJP4的配對單克隆抗體、檢測MRJP4的ELISA試劑盒和膠體金免疫試紙 
  • 項目單位 中國農業(yè)科學院蜜蜂研究所
  • 發(fā)明人 胡菡,魏俏紅,陳思,馮毛,孟麗峰,韓賓,房宇,馬川,李建科 
  • 行業(yè)類別
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 馮英俠
  • 發(fā)布時間 2022-01-10  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明公開了抗MRJP4的配對單克隆抗體、檢測MRJP4的ELISA試劑盒及膠體金免疫試紙。本發(fā)明以MRJP4重組蛋白為抗原采用細胞融合得到陽性細胞株,通過與其它蜂王漿主蛋白交叉反應檢測獲得MRJP4特異性融合細胞株,根據抗原表位配對檢測進行配對初篩,根據配對結果、抗體表位檢測和標準曲線繪制及樣本測定等,最終確定了有較好線性關系且靈敏度高的抗MRJP4的配對單克隆抗體6H9和8C9。本發(fā)明分別構建了檢測MRJP4的ELISA檢測試劑盒以及膠體金免疫檢測試紙。本發(fā)明試劑盒特異性強,檢測范圍為1.563?100ng/mL,檢測靈敏度為3.758ng/mL,批內批間CV值小于10%。
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  • 02

    說明書

    1.配對的抗MRJP4單克隆抗體,其特征在于,由微生物保藏編號為CGMCC No. 17294的雜交瘤細胞株6H9分泌的抗MRJP4單克隆抗體和微生物保藏編號為CGMCC No. 17295的雜交瘤細胞株8C9分泌的抗MRJP4單克隆抗體組成。2.權利要求1所述的配對的抗MRJP4單克隆抗體在定性檢測樣品中是否含有MRJP4或定量檢測樣品中MRJP4含量的用途。3.一種檢測MRJP4含量的酶聯免疫試劑盒,包括:抗MRJP4的一抗,生物素標記的抗MRJP4的二抗,標準品,辣根過氧化物酶標記親和素,生物素標記抗體稀釋液,辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液,樣本稀釋液,濃洗滌液,底物溶液和終止液;其特征在于:所述的一抗是權利要求1所述的雜交瘤細胞株6H9分泌的抗MRJP4單克隆抗體,所述的二抗是權利要求1所述的雜交瘤細胞株8C9分泌的抗MRJP4單克隆抗體;或者所述的一抗是權利要求1所述的雜交瘤細胞株8C9分泌的抗MRJP4單克隆抗體,所述的二抗是權利要求1所述的雜交瘤細胞株6H9分泌的抗MRJP4單克隆抗體。4.一種檢測MRJP4的膠體金免疫檢測試紙,包括:金標墊,含有檢測線和質控線的NC膜,樣本墊,吸水墊和檢測底板;其特征在于,所述的金標墊含有權利要求1所述雜交瘤細胞株6H9分泌的單克隆抗體與膠體金的結合物;所述的NC膜含有一條檢測線和一條質控線;所述的檢測線由權利要求1所述的雜交瘤細胞株8C9分泌的單克隆抗體組成,所述的質控線由羊抗鼠IgG抗體組成;或者,所述的金標墊含有權利要求1所述的雜交瘤細胞株8C9分泌的單克隆抗體與膠體金的結合物;所述的NC膜含有一條檢測線和一條質控線;所述的檢測線由權利要求1所述的雜交瘤細胞株6H9分泌的所述的單克隆抗體組成,所述的質控線由羊抗鼠IgG抗體組成。5.按照權利要求4所述的膠體金免疫檢測試紙,其特征在于,所述的金標墊的制備方法,包括:(1)將膠體金溶液與雜交瘤細胞株6H9分泌的或雜交瘤細胞株8C9分泌的單克隆抗體結合得到膠體金-抗體結合物原液;(2)用工作液將膠體金-抗體結合物溶液稀釋后均勻加在玻璃纖維膜上,烤干,即得金標墊。6.按照權利要求5所述的膠體金免疫檢測試紙,其特征在于,步驟(1)中將雜交瘤細胞株6H9分泌的或雜交瘤細胞株8C9分泌的單克隆抗體與膠體金溶液在pH值為7.4時進行結合;步驟(2)中用工作液將膠體金-抗體結合物溶液按照1:4的體積比進行稀釋后均勻加在玻璃纖維膜上。7.按照權利要求4所述的膠體金免疫檢測試紙,其特征在于,雜交瘤細胞株6H9分泌的或雜交瘤細胞株8C9分泌的單克隆抗體在檢測線上的工作濃度為2 mg/mL,羊抗鼠IgG抗體在質控線上的工作濃度為1 mg/mL。
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