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野山參與栽培參多重PCR檢測試劑盒及鑒定方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-07
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201010118823.6 
  • 技術(專利)名稱 野山參與栽培參多重PCR檢測試劑盒及鑒定方法 
  • 項目單位 北華大學
  • 發明人 李明成,張麗華,夏薇,王冰梅 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 蔣承瑞
  • 發布時間 2022-01-07  
  • 01

    項目簡介

    一種中藥檢測領域的野山參與栽培參多重PCR檢測試劑盒,其特點是,含有緩沖液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一種,Taq DNA聚合酶,待檢樣本DNA,雙蒸餾水的鑒定反應體系;含有緩沖液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一種,Taq DNA聚合酶,野山參與栽培參DNA 1∶1混合物,雙蒸餾水的陽性對照反應體系;含有緩沖液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一種,Taq DNA聚合酶,五加科同屬DNA 1∶1混合物,雙蒸餾水的陰性對照反應體系;其檢測鑒定方法是設計野山參與栽培參線粒體DNA二對特異寡核苷酸引物、人工合成野山參與栽培參線粒體DNA對特異寡核苷酸引物、確定反應程序和結果判定等步驟。能夠準確同時區別野山參與栽培參的特異性,檢測結果可靠。
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  • 02

    說明書

    1.一種野山參與栽培參DNA鑒定方法,其特征是,它包含下述步驟:
    (1)設計野山參線粒體DNA一對特異寡核苷酸引物與栽培參線粒體DNA一
    對特異寡核苷酸引物,如下引物1和引物2:
    引物1
    5’TACACATGTAACTGTAACTCTAC3’
    5’GCAGATCATCTACAGCTAACGA3’
    引物2
    5’CGACCCAGACTCGTGAGAGTC3’
    5’ATCGTCATATTAGATAGCTCAT3’
    (2)人工合成野山參和栽培參線粒體DNA如上兩對引物,采用ABI3900高
    通量合成儀,固相亞磷酰胺三酯合成;
    (3)分別將野山參與栽培參DNA檢測的鑒定反應體系、陽性對照反應體系、
    陰性對照反應體系各100μl加入反應管中,置于PCR反應儀中按下列程序進行:
    94℃預變性3-7min,94℃30s,退火57℃30s,72℃1min-30s,30個循
    環,72℃延伸5-8min,4℃;
    (4)結果判定
    反應產物使用1.5-1.8%瓊脂糖凝膠,在DYY-III型水平電泳儀上電泳,
    60-70mV電泳45min-1h,分子量100-1500bp的DNA?Marker作參照,凝膠成像分
    析系統觀察和分析得出結果。
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