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體外擴增基因編輯活化T細胞的培養方法、試劑盒及應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-08-19
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710325993.3 
  • 技術(專利)名稱 體外擴增基因編輯活化T細胞的培養方法、試劑盒及應用 
  • 項目單位 成都美杰賽爾生物科技有限公司
  • 發明人 鄧濤,喻堃,徐國鋒,盧鈾 
  • 行業類別 藥品-包裝材料
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 周宇帆
  • 發布時間 2021-08-19  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供了一種體外擴增基因編輯活化T細胞的培養基,其特征在于,所述培養基包含T細胞基礎培養基,還包含:白細胞介素7(IL?7)200?1000IU/ml、白細胞介素21(IL?21)300?1000IU/ml、抗CD40單克隆抗體80?120ng/ml、絲氨酸0.2?1.0mmol/ml和S?2?羥戊二酸0.3?1.0mmol/ml。本發明還提供了含上述培養基的試劑盒以及利用上述培養基進行體外擴增基因編輯活化T細胞的方法以及在培養T細胞方面的應用。利用本發明的培養基,在無需加入異體血清及其他活化T細胞因子的條件下可以大量擴增基因編輯活化T細胞。本發明方法能夠激活擴增T細胞500?1000倍,明顯高于現有技術。
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  • 02

    說明書

    1.一種體外擴增基因編輯活化T細胞的培養基,其特征在于,所述培養基為RPMI-1640培養基、白細胞介素7(IL-7)200-1000IU/ml、白細胞介素21(IL-21)300-1000IU/ml、抗CD40單克隆抗體80-120ng/ml、絲氨酸0.2-1.0mmol/ml和S-2-羥戊二酸0.3-1.0mmol/ml。2.根據權利要求1所述的培養基,其特征在于,所述培養基為RPMI-1640培養基、白細胞介素7(IL-7)500IU/ml、白細胞介素21(IL-21)550IU/ml、抗CD40單克隆抗體100ng/ml、絲氨酸0.45mmol/ml和S-2-羥戊二酸0.5mmol/ml。3.包含權利要求1~2所述的培養基的試劑盒。4.一種體外擴增基因編輯活化T細胞的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:(1)對經基因修飾后的T細胞進行預培養,培養時,所用培養基為RPMI-1640培養基和抗CD40單克隆抗體80-120ng/ml;(2)預培養后,向步驟(1)培養基中加入白細胞介素7(IL-7)200-1000IU/ml、白細胞介素21(IL-21)300-1000IU/ml、抗CD40單克隆抗體80-120ng/ml、絲氨酸0.2-1.0mmol/ml和S-2-羥戊二酸0.3-1.0mmol/ml,進行高效擴增培養。5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,培養時間為48小時。6.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,步驟(2)中,向步驟(1)培養基中加入白細胞介素7(IL-7)500IU/ml、白細胞介素21(IL-21)550IU/ml、抗CD40單克隆抗體100ng/ml、絲氨酸0.45mmol/ml和S-2-羥戊二酸0.5mmol/ml,進行高效擴增培養。7.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述基因修飾的技術包括ZEN、TALEN或CRISPR/Cas9;進行所述基因修飾時,是修飾T細胞中的相關激活和/或抑制基因。8.權利要求1~2任一項所述培養基在培養T細胞方面的應用。
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專利技術附圖

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