本發明涉及醫學生物檢測技術領域，本發明應用microRNA芯片技術篩選出被Brachyury調控后發生顯著上調的若干microRNAs，并對這一系列microRNAs進行了Real?Time PCR驗證。本發明提供了Brachyury陽性腫瘤的分子標記物，該分子標記物hsa?miR?4286、hsa?miR?449c在肺癌患者中呈現顯著高表達，而在其它肺部實質性病變患者和正常人群中則未見表達水平異常。本發明還提供了microRNAs在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用。本發明的microRNAs可以在腫瘤發生的早期進行篩查或診斷，對于腫瘤的早期治療和醫療成本的節約都具有重要意義。

1.檢測microRNAs表達量的試劑在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑盒中
的應用，其特征在于，所述的microRNAs選自hsa-miR-4286、hsa-miR-449c中的任一或兩者
的組合；所述的Brachyury陽性腫瘤為肺癌。
2.根據權利要求1所述的檢測microRNAs表達量的試劑在制備早期篩查或診斷
Brachyury陽性腫瘤試劑盒中的應用，其特征在于，所述的Brachyury陽性腫瘤是指該腫瘤
中Brachyury呈現出高水平的表達。
3.根據權利要求1或2所述的檢測microRNAs表達量的試劑在制備早期篩查或診斷
Brachyury陽性腫瘤試劑盒中的應用，其特征在于，所述的檢測microRNAs表達量的試劑是
寡聚核苷酸。
4.根據權利要求3所述的檢測microRNAs表達量的試劑在制備早期篩查或診斷
Brachyury陽性腫瘤試劑盒中的應用，其特征在于，所述的寡聚核苷酸包括反轉錄引物、PCR
上游引物，或PCR下游引物。
5.根據權利要求3所述的檢測microRNAs表達量的試劑在制備早期篩查或診斷
Brachyury陽性腫瘤試劑盒中的應用，其特征在于，所述的寡聚核苷酸序列為如下A組、B組，
或AB兩組的組合：
A組：反轉錄引物如SEQ ID NO:3所示；PCR上游引物如SEQ ID NO:4所示；PCR下游引物
如SEQ ID NO:5所示；
B組：反轉錄引物如SEQ ID NO:6所示；PCR上游引物如SEQ ID NO:7所示；PCR下游引物
如SEQ ID NO:5所示。
6.根據權利要求4或5所述的檢測microRNAs表達量的試劑在制備早期篩查或診斷
Brachyury陽性腫瘤試劑盒中的應用，其特征在于，所述的試劑盒包括以下組分：
A.反轉錄引物，1管10uM濃度，100uL；
B.PCR上游引物，1管10uM濃度，100uL/管；
C.PCR下游引物，1管10uM濃度，100uL/管；
D.正常標準品，1管，10uM濃度，100uL。
7.根據權利要求6所述的檢測microRNAs表達量的試劑在制備早期篩查或診斷
Brachyury陽性腫瘤試劑盒中的應用，其特征在于，利用所述的寡聚核苷酸檢測hsa-miR-
4286或hsa-miR-449c表達量的方法包括如下步驟：
取樣本中的總RNA，加入反轉錄引物、5×PrimeScript Buffer、PrimeScript RT
Enzyme Mix I、RNase Free dH₂O反轉錄成cDNA，應用EASY Dilution稀釋試劑盒中的正常
標準品，以所反轉錄的cDNA為模板向反應體系中加入PCR上游引物、PCR下游引物，通過反轉
錄聯合聚合酶鏈式反應檢測hsa-miR-4286或hsa-miR-449c的表達量。