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一種安福霉素類化合物及其制備方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-30
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310428077.4 
  • 技術(專利)名稱 一種安福霉素類化合物及其制備方法 
  • 項目單位 福建省微生物研究所
  • 發明人 鄭衛,楊煌建,張祝蘭,周劍,黃凱,王德森 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李羿
  • 發布時間 2021-07-30  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供一種安福霉素類化合物及其制備方法,所述方法如下:將鏈霉菌菌株的單孢子在新鮮的天冬氨酸瓊脂斜面培養,菌株斜面培養成熟后接種于種子培養基,再轉接入發酵培養基培養,得到發酵液;將發酵液進行大孔樹脂吸附柱層析,得到粗提物;將粗提物用水懸浮,用等體積正丁醇萃取,加入等體積蒸餾水,充分振蕩混勻后兩相分離取水相;將水相液濃縮后進行中壓反相硅膠柱層析以獲得二次粗產物,并分部收集安福霉素類化合物。本發明通過微生物發酵制得一種新的安福霉素類化合物,其具有抗菌性。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種安福霉素類化合物,其特征在于:所述安福霉素類化合物的分子結構式如下:其中R為CH(CH3)2或CH2CH(CH3)2。2.根據權利要求1所述的一種安福霉素類化合物的制備方法,其特征在于:包括如下步驟:步驟一:將暗灰鏈霉菌菌株(Streptomyces?canus)FIM-0916的單孢子用新鮮的天冬氨酸瓊脂進行斜面培養,菌株斜面培養成熟后接種于種子培養基,再轉接入發酵培養基培養,得到暗灰鏈霉菌菌株(Streptomyces?canus)FIM-0916發酵液;步驟二:將步驟一所獲得的暗灰鏈霉菌菌株(Streptomyces?canus)FIM-0916發酵液進行大孔樹脂吸附柱層析,得到粗提物;步驟三:將步驟二所獲得的粗提物用水懸浮,調pH至2-3,用等體積正丁醇萃取,正丁醇層調pH至7-8,加入等體積蒸餾水,充分振蕩混勻后?兩相分離取水相;步驟四:將步驟三所獲得的水相液濃縮后進行中壓反相硅膠柱層析以獲得二次粗產物,進行中壓反相硅膠柱層析時,先采用體積分數為10%乙腈含0.1%三氟乙酸的水溶液為流動相平衡20分鐘后,然后流動相采用體積比10%~70%的乙腈-90%~30%含0.1%三氟乙酸的水溶液系統梯度洗脫120min,分部收集安福霉素類化合物,流動相的流速為5mL/min;最后根據高效液相色譜檢測分部收集液;所述暗灰鏈霉菌菌株(Streptomyces?canus)FIM-0916,于2013年6月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號,保藏編號為CGMCC?No.7792。3.根據權利要求2所述的一種安福霉素類化合物的制備方法,其特征在于:所述步驟一具體為:將暗灰鏈霉菌菌株(Streptomyces?canus)FIM-0916的單孢子在新鮮的天冬氨酸瓊脂斜面30℃培養7-10天;待暗灰鏈霉菌菌株(Streptomyces?canus)FIM-0916斜面培養成熟后接種于種子培養基中,并將其置于恒溫搖床中振蕩培養40~48h,溫度30℃,轉速250r/min;然后按1.0%的移種量將所獲得的種子液轉接入已消毒滅菌的發酵培養基培養110~130h,溫度28℃,轉速250r/min。4.根據權利要求2或3所述的一種安福霉素類化合物的制備方法,其特征在于:所述斜面培養基的組分及其含量如下:酵母提取物4.0%,麥芽提取物10.0%,葡萄糖4.0%,瓊脂18.0%,蒸餾水1L;且所述斜面培養基的pH為7.3-7.5,所述斜面培養基組分中的百分數均為質量分數。5.根據權利要求2或3所述的一種安福霉素類化合物的制備方法,其特征在于:所述種子培養基的組分及其含量如下:蔗糖30.0%,KNO3?1.0%,K2HPO4?1.0%,蛋白胨5.0%,酵母膏2.0%,KCl?0.5%,MgSO4·7H2O?0.5%,FeSO4.7H2O?0.01%,且所述種子培養基pH為7.3-7.5,所述種子培養基組分中的百分數均為質量分數。6.根據權利要求2或3所述的一種安福霉素類化合物的制備方法,其特征在于:所述發酵培養基的組分及其含量如下:黃豆粉10.0%,葡萄糖10.0%,NaCl?5.0%,KNO31.0%,CaCO31.0%,且所述發酵培養基pH為7.3-7.5,所述發酵培養基組分中的百分數均為質量分數。7.根據權利要求2所述的一種安福霉素類化合物的制備方法,其特征在于:所述步驟四中的高效液相色譜檢測條件為:分析柱為ODS?C18,其中C18粒徑為5μm,分析柱長度乘以內徑為250×4.6mm;流動相為體積比35:65的含0.1%三氟乙酸的水-乙腈,流速為1.0mL/min;柱溫為40℃;檢測波長為210nm。
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