本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種發(fā)酵制備檸檬酸的工藝，其包括如下步驟：步驟1）制備發(fā)酵培養(yǎng)基，步驟2）活化黑曲霉種子液，步驟3）發(fā)酵產(chǎn)酸。本發(fā)明發(fā)酵工藝成本低廉，檸檬酸產(chǎn)量高。

1.一種發(fā)酵制備檸檬酸的工藝，所述工藝包括如下步驟：步驟1）制備發(fā)酵培養(yǎng)基：將玉米秸稈破碎，然后與玉米皮按照2:1的質(zhì)量比混合，粉碎至粒徑50-100目，然后添加到5-6倍重量的水中，邊攪拌邊升溫至80℃，保溫30min，然后添加磷酸二氫鉀1g/L、磷酸氫二鉀1g/L、七水硫酸鎂0.2g/L、七水硫酸亞鐵0.01g/L、一水硫酸錳0.01g/L，121℃濕熱滅菌30min，冷卻，得到木霉培養(yǎng)液；將里氏木霉按照10%的接種量接入到木霉培養(yǎng)液，培養(yǎng)72-96h，培養(yǎng)時(shí)控制攪拌速度為100rpm，培養(yǎng)溫度為30-32℃，通過流加氨水控制發(fā)酵過程的pH為4-5；培養(yǎng)完成后，進(jìn)行過濾除去菌體，往所得液體中添加甲醇以及氫氧化鈣，攪拌均勻，即得發(fā)酵培養(yǎng)基；步驟2）活化黑曲霉種子液：將黑曲霉按照常規(guī)培養(yǎng)24h獲得黑曲霉種子液，然后將種子液進(jìn)行超聲處理；步驟3）發(fā)酵產(chǎn)酸：將步驟2）所得黑曲霉種子液按照8-10%的接種量接入到含有步驟1）所得發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵過程中通過流加氨水控制pH在4-4.3，發(fā)酵時(shí)間為60h；所述步驟1）中，甲醇的添加量為0.2%體積比，氫氧化鈣的添加量為10wt%；所述超聲處理參數(shù)為：超聲頻率30KHz，功率6W，超聲間隔15s，超聲時(shí)間1s，總超聲時(shí)間為160s；所述步驟3）中，發(fā)酵參數(shù)為：發(fā)酵溫度為34-35℃，罐壓為0.03-0.04MPa，風(fēng)量為500-600L/h。