本發明涉及嗜酸乳桿菌、副干酪乳桿菌或鼠李糖乳桿菌的深凍制品的制備方法；提供了一種在制備嗜酸乳桿菌、副干酪乳桿菌或鼠李糖乳桿菌深凍產品過程中使用的培養基；發明人將影響細菌發酵的兩個關鍵因素相結合，創造性地在高密度發酵過程中采用兩段式pH、三段式變溫相結合的方式進行發酵，最大細胞生物量和最高發酵活力較單一方式得到明顯提高，同時得到的凍干制劑中活菌數高、穩定性好。還提供了一種優良的深凍保護劑。

1.嗜酸乳桿菌、副干酪乳桿菌或鼠李糖乳桿菌深凍產品的制備方法，按以下步驟進行：一、高密度培養將按常規方法活化的嗜酸乳桿菌、副干酪乳桿菌或鼠李糖乳桿菌以2%的接種量接種于滅菌的培養基中進行發酵；發酵過程中pH采用兩段式，總發酵時間10h，第一階段將發酵液的pH用質量濃度10%的氨水控制在6.0-6.5，發酵7.0h；第二階段不控制發酵液的pH，發酵3.0h；發酵過程中采用變溫培養模式，第一階段將發酵溫度控制在42.5-45℃，發酵3.5h；第二階段將發酵溫度控制在35-37℃，發酵3.5h；第三階段將發酵溫度控制在37-40℃，發酵3h；其中所述培養基為：80-120g的脫脂乳粉，50-70g的甜菜糖蜜，40-60g的玉米淀粉糖漿、25g的NaCl、5g的谷胱甘肽、25-30g的酵母膏或酵母粉、12mg的尿嘧啶和黃嘌呤、0.005mg的生物素和葉酸、2.0mg的尼克酸和泛酸鈣、2.0mg的核黃素及1.0mg鹽酸硫胺素加入蒸餾水并定容至1000mL；在發酵過程中攪拌速度為120rpm，直至發酵結束；其中，尿嘧啶和黃嘌呤的比例為1：2；生物素和葉酸的比例為1：1；尼克酸和泛酸鈣的比例為1：3，培養基中的NaCl是在發酵進行到8h時添加到發酵液中的；二、洗脫三、富集四、菌體的深凍保護將步驟三獲得的菌體濃縮物與深凍保護劑以質量比為10：1~10：2進行混合，將此混合物在4~10℃的環境中放置12h；其中深凍保護劑的組成為：25g的脫脂乳粉、2g的斯盤60、10g的海藻糖、5g的蔗糖糖蜜和1.5g的維生素C，5g的甘油、0.5g的細胞松弛素B，將深凍保護劑中的各組分滅菌后直接加入到發酵液中；五、菌體的深凍將步驟四獲得的混合物以3℃/min的降溫速率于4℃降至-20℃，保持5min；將混合物以4℃/min的降溫速率于-20℃降至-60℃，保持20min；六、菌體的包裝、貯藏與運輸將深凍產品在-60℃的粉碎機中粉碎后包裝于滅菌的鋁箔袋中，于-80℃的環境中貯藏，運輸時采用充有液氮或干冰的保溫箱進行運輸。2.根據權利要求1所述的方法，其中所述的洗脫步驟具體為：發酵液在0～20℃時，加入與發酵液等重量的質量濃度為15%的檸檬酸鈉溶液或質量濃度為15%的磷酸鈉溶液對發酵液進行蛋白洗脫。3.根據權利要求2所述的方法，其中所述的富集步驟具體為：洗脫結束后，將發酵液的溫度降至4℃，依次采用膜過濾、連續式離心進行濃縮，具體膜濃縮操作為：用孔徑為100～200nm、面積為1.0m²的陶瓷膜，在跨膜壓力為150KPa進行膜濃縮處理，至發酵液的濃縮倍數達到3；離心濃縮具體為：以30kg/min的進料量用連續自動出料式離心機進行離心濃縮，控制出料量為5kg/min。?4.按權利要求1-3任一項所述的方法制備的嗜酸乳桿菌、副干酪乳桿菌或鼠李糖乳桿菌的深凍產品。