本發(fā)明公開(kāi)了一種從南極磷蝦中提取生物素的方法及高效薄層掃描分析方法：用二甲基甲酰胺從南極磷蝦中提取生物素，經(jīng)離心除雜和濃縮制備樣品液，同生物素標(biāo)準(zhǔn)品液采用外標(biāo)一點(diǎn)法，在涂有硅膠GF高效薄層板上展開(kāi)，展開(kāi)劑為按比例配制的二氯甲烷、異丙醇、甲醇和冰乙酸的混合液。展完后的展板，用染色液噴霧染色。將板放進(jìn)通風(fēng)櫥5分鐘后，噴上10%的石蠟氯仿溶液。以530nm吸收波長(zhǎng)進(jìn)行薄層掃描，計(jì)算得到南極磷蝦中的生物素含量。方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速、可靠、穩(wěn)定。

1.一種檢測(cè)生物素的高效薄層掃描分析方法，其特征在于：步驟如下：
(1)取待檢測(cè)樣品液4μL，點(diǎn)在涂有硅膠GF254高效薄層板上，以體積比二氯甲烷：異
丙醇：甲醇：冰乙酸＝1～3：1～3：2～3：0.01～0.15作為展開(kāi)劑，在展開(kāi)缸內(nèi)展開(kāi)，展
距為6cm，并采用外標(biāo)一點(diǎn)法點(diǎn)1μL生物素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，同時(shí)展開(kāi)，展開(kāi)的時(shí)間為40分鐘，
展開(kāi)的距離為6cm，然后晾干；
(2)將2,4-二甲氨基肉桂醛、濃硫酸和無(wú)水乙醇混合，配成染色液，其中2,4-二甲氨基
肉桂醛終濃度為0.1～0.2％，硫酸終濃度為10～20％；展完后晾干的展板，用染色液噴霧染色，
將板放進(jìn)通風(fēng)櫥5分鐘后，噴上10％的石蠟氯仿溶液；冷卻后放入Camag薄層掃描儀-Ⅲ掃描，
掃描波長(zhǎng)為530nm，通過(guò)檢測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)紫外線的吸光度并計(jì)算得到生物素的含量；
步驟(1)中，生物素標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度分別為0.19mg/mL、0.3mg/mL、0.66mg/mL、1.28mg/mL
和3.31mg/mL；
所述樣品液是通過(guò)以下方法制備得到的：
(1)取1公斤冷凍的南極磷蝦，在40～60℃烘干，然后加入3～9升的氯仿，在常溫下
攪拌提取1～3次，每次時(shí)間為30～60分鐘，過(guò)濾得處理蝦粉；
(2)將上述得到的處理蝦粉按蝦粉：二甲基甲酰胺＝1g：25～40mL的比例加入二甲基甲
酰胺，在75～95℃水浴上攪拌提取1～2小時(shí)，得提取液；
(3)上述得到的提取液在10,000rpm下離心10分鐘，取上清液，向上清液中加入等體
積量的乙醇，50～65℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得濃縮液，即為含有生物素的樣品液。