本發明公開了一種檢測小牛血清去蛋白注射液中單磷酸腺苷含量的方法。本發明方法包括如下步驟：(1)測定熒光共振能量轉移探針于526nm處的熒光發射峰的強度，記作F；(2)向所述熒光共振能量轉移探針中加入待測的小牛血清去蛋白注射液進行反應；測定所述反應后的體系于526nm處的熒光發射峰的強度，記作F；(3)根據式(1)所示的Stern?Volmer方程，即能計算出所述小牛血清去蛋白注射液中單磷酸腺苷的含量；所述待測的小牛血清去蛋白注射液是經過前處理步驟的。本發明檢測方法穩定，并且操作簡便，靈敏度高，適合做微量追蹤，比色譜的專屬性更高；同時操作和對檢測設備以及環境的要求比質譜更低，更適合用于對批量生產產品的檢測。

1.一種檢測小牛血清去蛋白注射液中單磷酸腺苷含量的方法，包括如下步驟：
(1)測定熒光共振能量轉移探針于526nm處的熒光發射峰的強度，記作F₀；
(2)向所述熒光共振能量轉移探針中加入待測的小牛血清去蛋白注射液進行反應；測
定所述反應后的體系于526nm處的熒光發射峰的強度，記作F；
(3)根據式(1)所示的Stern-Volmer方程，即能計算出所述小牛血清去蛋白注射液中單
磷酸腺苷的含量；
F 0 F = 1 + k Q τ 0 [ Q ] = 1 + K D [ Q ] - - - ( 1 ) ]]>式(1)中，[Q]表示待測小牛血清去蛋白注射液中單磷酸腺苷的摩爾濃度，τ₀表示所述熒
光共振能量轉移探針的平均熒光壽命，為1.5×10^-9s，k_Q表示熒光淬滅速率常數，為1.2×
10¹¹L·mol^-1·s^-1，K_D表示Stern-Volmer常數；
所述熒光共振能量轉移探針的能量供體和能量受體分別為β-環糊精修飾的ZnS量子點
和三羥基黃酮，所述β-環糊精修飾的ZnS量子點的粒徑為2～4nm；所述熒光共振能量轉移探
針的pH值為4.5；
所述待測的小牛血清去蛋白注射液是按照包括如下步驟的方法進行前處理的：
a)向所述待測的小牛血清去蛋白注射液中加入NaOH水溶液，并進行煮制，將體系的pH
值調至6.8～7.2；
b)向步驟a)處理后的體系中加入活性炭進行吸附；
c)將步驟b)處理后的體系用微孔膜進行過濾；
d)對經步驟c)處理后的體系進行固相萃取，洗脫劑為甲醇，收集洗脫液，即完成對所述
小牛血清去蛋白注射液的前處理。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述反應的溫度為20℃～25
℃，所述反應的時間為10～20min。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：步驟a)中，所述NaOH水溶液的摩爾濃度
為6mol/L，所述NaOH水溶液與所述待測的小牛血清去蛋白注射液的體積比為1：1；
在水浴的條件下進行煮制；所述煮制的溫度為59～61℃，時間為35～45min。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：步驟b)中，所述活性炭的質量加入量為所
述待測的小牛血清去蛋白注射液質量的1.8％～2.0％。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：步驟c)中，所述微孔膜的孔徑為0.22μm。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：步驟d)中，所述固相萃取的固體吸附劑為
C18。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：所述熒光共振能量轉移探針中，所述β-環
糊精修飾的ZnS量子點的摩爾濃度為5.0×10^-5～7.5×10^-5mol/L，所述三羥基黃酮的摩爾
濃度為1.0×10^-6～2.5×10^-6mol/L，所述β-環糊精修飾的ZnS量子點與所述三羥基黃酮的
摩爾比為20：1。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：所述熒光共振能量轉移探針中，所述β-環
糊精修飾的ZnS量子點的摩爾濃度為5.0×10^-5mol/L，所述三羥基黃酮的摩爾濃度為2.5×
10^-6mol/L。
9.熒光共振能量轉移探針在檢測藥物中單磷酸腺苷中的應用；
所述熒光共振能量轉移探針的能量供體和能量受體分別為β-環糊精修飾的ZnS量子點
和三羥基黃酮，所述β-環糊精修飾的ZnS量子點的粒徑為2～4nm；所述熒光共振能量轉移探
針的pH值為4.5。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于：所述藥物為小牛血清去蛋白注射液。